Question

【題目】某生物興趣小組試圖探究牛和山羊的瘤胃中的微生物對尿素是否有分解作用，設計了以下實驗，并成功篩選到能降解尿素的細菌（目的菌）．培養基成分如表所示，實驗步驟如圖所示．請分析回答問題：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO47H2O	0.2g
葡萄糖	10g
尿素	1g
瓊脂	15g
溶解后自來水定容到1000mL

（1）從培養基的物理性質分析，該培養基屬于；從培養基的用途分析，該培養基屬于 ．
（2）在實驗過程中：①培養基、培養皿；②玻棒、試管、錐形瓶、吸管；③瘤胃中液體；④涂布器．其中需要滅菌是（填序號）．
（3）分離分解尿素的細菌實驗時，甲同學從培養基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落．甲同學堅信自己的實驗結果是準確的，則甲同學的實驗結果產生差異的原因最可能是（填序號） ①取樣不同 ②培養基污染 ③操作失誤 ④沒有設置對照
（4）為確定實驗中微生物屬于尿素分解菌，可在培養基中加入酚紅指示劑，若菌落變成色，說明瘤胃中的微生物能分解酵素．理由是 ．
（5）為進一步確定取自瘤胃中液體的適當稀釋倍數，將接種的培養皿放置在37°C恒溫培養箱中培養24h～48h，觀察并統計具有紅色環帶的菌落數，結果如表，其中倍的稀釋比較合適．

稀釋倍數	103	104	105	106	107
菌落數	＞500	367	248	36	18

（6）若要在右圖實驗中對瘤胃中的目的菌進行計數，應采用什么計數法？ ， 該方法的缺點是容易導致結果偏小，請寫出結果偏小的原因 ． （寫出一項即可）

Answer 1

【答案】
（1）固體培養基；選擇培養基
（2）①、②、④
（3）①
（4）紅；細菌合成的脲酶將尿素分解成氨,PH增高,使酚紅指示劑變紅
（5）106或105
（6）活菌計數法（或間接計數法）；兩個或多個細胞可能共同形成一個菌落,導致結果偏小（一些細菌在培養過程中死亡后,不能形成菌落,導致結果偏小）
【解析】解：（1）分析表格，培養基成分中含有瓊脂作為凝固劑，因此從培養基的物理性質分析，該培養基屬于固體培養基；并且培養基中加入尿素為唯一氮源，因此從培養基的用途分析，該培養基屬于選擇培養基．（2）在實驗過程中，①培養基、培養皿，②玻棒、試管、錐形瓶、吸管，④涂布器需要滅菌處理，而③瘤胃中液體如果經過滅菌將使其中的微生物全部死亡．（3）根據題意可知，甲同學堅信自己的實驗結果是準確的，則甲同學的實驗結果產生差異的原因最可能是取樣不同．（4）細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，PH增高，使酚紅指示劑變紅，因此以通過在培養基中加入酚紅指示劑，檢測培養基pH的變化來判斷尿素是否被分解．（5）觀察并統計菌落數應選30﹣300之間的培養皿進行統計，故應選106或105倍的稀釋比較合適．（6）若要在右圖實驗中對瘤胃中的目的菌進行計數，應采用活菌計數法（或間接計數法），兩個或多個細胞可能共同形成一個菌落，導致結果偏小．

所以答案是：（1）固體培養基 選擇培養基 （2）①、②、④（3）①（4）紅 細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，PH增高，使酚紅指示劑變紅（5）106或105（6）活菌計數法（或間接計數法） 兩個或多個細胞可能共同形成一個菌落，導致結果偏小（一些細菌在培養過程中死亡后，不能形成菌落，導致結果偏小）