Question

【題目】實驗設計

關于土壤中某樣品細菌的分離與計數的實驗操作步驟如下:

土壤取樣:

從肥沃、濕潤的土壤中取樣。先鏟去表層土3左右,再取樣,將樣品裝入事先準備好的________中。

（1）樣品的稀釋

稀釋原因:樣品的________直接影響平板上生長的________

稀釋標準:選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養,保證獲得菌落數在________之間,便于計數。

（2）稀釋倍數

a.測定土壤中細菌的數量,一般選用________倍的稀釋液進行平板培養;

b.測定放線菌的數量,一般選用________倍的稀釋液進行平板培養;

c.測定真菌的數量,一般選用________倍的稀釋液進行平板培養。

（3）微生物的培養與觀察

培養:不同種類的微生物,往往需要不同的培養________和培養________

觀察:每隔________統計一次________數目,最后選取菌落數目________時的記錄作為結果。

（4）細菌的計數

當菌落數目穩定時,取同一________下的3個________進行計數,求出________,并根據所對應的________計算出樣品中細菌的數目。

Answer 1

【答案】 信封 稀釋程度 菌落數目 30-300 104、105和106 103、104、105 102、103、104 溫度 時間 24h 菌落 穩定 稀釋度 平板 菌落數的平均值 稀釋度

【解析】試題分析：本題主要考查微生物的分離和計數等相關知識點，識記微生物的分離步驟，再結合題意準確回答本題。

土壤取樣時，由于表層土壤相對干燥，小動物分布較少，所以土壤取樣時，應先鏟去表層土3～8cm左右，再取樣，再將樣品裝入事先準備好的信封中。

(1)樣品需要稀釋，因為稀釋程度直接影響平板上生長的菌落數目，選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養，以保證獲得菌落數在30～300之間，適于計數的平板。

(2) 在土壤中，細菌的數量比真菌更多，在測定土壤中不同種類的生物數量，所用的稀釋倍數是不同的，為了確保稀釋后能形成菌落數在30-300之間的培養皿，在進行土壤中微生物的分離與計數時，就需要按照不同的稀釋度分別進行涂布，測定細菌一般選擇104、105、106倍稀釋，測定放線菌一般選擇103、104、105倍稀釋，測定真菌一般選擇102、103、104倍稀釋。

（3）不同種類的微生物，往往需要不同的培養溫度和培養時間，用稀釋涂布平板法統計活菌數目時，每隔24h統計一次菌落數目，最后選取菌落數目穩定時的記錄作為結果，這樣可以防止因培養時間不足而遺漏菌落的數目。

（4）當菌落數目穩定時,取同一個稀釋度下3個平板進行計數,求出菌落數的平均值，并根據所對應的稀釋度計算出樣品中細菌的數目。