Question

【題目】圖示某實驗小組從土壤中篩選能高效降解地溝油細菌的過程。請回答：

（1）土壤樣品應該采集自_______________的土壤中。

（2）圖中的細菌培養基中主要物質有水、無機鹽、___________、___________，從培養基的物理狀態分析，在該培養基的配制過程中，還需要加入_____________。

（3）圖中的選擇培養基應以______________為唯一碳源。在鑒別培養基中可加入適量的________________（試劑）于平板中的菌落周圍，洗去浮色后，如果菌落周圍的現象是________________，則說明此菌株能夠降解地溝油中的脂肪。

（4）若使用稀釋涂布平板法對菌液中細菌進行計數，需先將菌液進行_______________，然后將不同濃度的菌液用____________涂布到固體培養基表面，培養后計數。采用這種計數方法統計到的細菌數目往往比實際數目______，原因是________________。為了排除________________，需設置接種等量無菌水的培養基作為空白對照。

Answer 1

【答案】被地溝油污染 碳源 氮源 瓊脂 地溝油 蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ 出現透明圈 （一系列）梯度稀釋 涂布器 少 兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 實驗組中非測試因素對實驗結果的影響

【解析】

1、實驗室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養、溫度。pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。

2、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。（2）常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。

（1）實驗的目的是從土壤中篩選能高效降解地溝油細菌，因此土壤樣品應該采集自被地溝油污染的土壤中。

（2）圖中的細菌培養基中主要物質有水、無機鹽、碳源、氮源。配置固體培養基還需要加入瓊脂。

（3）實驗的目的是從土壤中篩選能高效降解地溝油細菌，因此該選擇培養基應以地溝油為唯一碳源。在鑒別培養基中可加入適量的蘇丹Ⅲ或蘇丹IV于平板中的菌落周圍，洗去浮色后，如果菌落周圍的現象是出現透明圈，則說明此菌株能夠降解地溝油中的脂肪。

（4）若使用稀釋涂布平板法對菌液中細菌進行計數，需先將菌液進行梯度稀釋，然后將不同濃度的菌液用涂布器涂布到固體培養基表面，培養后計數。采用這種計數方法統計到的細菌數目往往比實際數目少，原因是兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。為了排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，需設置接種等量無菌水的培養基作為空白對照。