Question

【題目】閱讀以下材料回答下列小題

乙型腦炎病毒（JEV）是一種RNA病毒，病毒的E蛋白參與病毒復制過程。研究人員利用 基因重組的方法構建了二種新型JEV疫苗：DNA疫苗和E蛋白疫苗。圖示主要流程。

【1】研究發現：受體細胞為大腸桿菌或酵母菌時，所形成的E蛋白結構不完全相同，最可能的原因是：（ ）

A.兩種受體細胞在基因表達時所使用的密碼子不同

B.大腸桿菌無細胞核，酵母菌有細胞核可進行基因轉錄

C.大腸桿菌無膜結構的細胞器，無法對蛋白質進一步加工

D.兩種受體細胞在基因表達時所遵循的堿基互補配對原則不同

【2】①代表什么過程，②所需要的酶是 （ ）

A.轉錄 DNA聚合酶與DNA連接酶

B.逆轉錄 逆轉錄酶與RNA聚合酶

C.翻譯 DNA聚合酶與RNA聚合酶

D.逆轉錄 限制酶與DNA連接酶

【3】如圖表示N質粒和成功導入E蛋白基因的質粒EN。為篩選含EN的菌落，可用含不同抗生素：氨芐青霉素和四環素的平板培養基進行篩選，現得到A、B、C三類菌落，生長情況如表。（“+”代表生長，“-”代表不生長）據圖和表分析，不能得出的結論是（ ）

平 板 菌 落	A	B	C
無抗生素	+	+	+
氨芐青霉素	+	+	-
四環素	+	-	-
氨芐青霉素+四環素	+	-	-

A.A菌落細胞被導入了N質粒B.兩種抗生素均能抑制E蛋白表達

C.C菌落細胞未被導入任何質粒D.B菌落細胞被導入EN質粒

Answer 1

【答案】

【1】C

【2】D

【3】B

【解析】

基因表達載體的基本結構包括復制原點、目的基因、標記基因、啟動子、終止子等。根據題干信息和圖形分析，N是載體質粒，其含有的氨芐青霉素抗性基因（ampr）和四環素抗性基因（tetr）都屬于標記基因，可以用檢測目的基因是否導入受體細胞；EcoRV酶為限制酶，其切割質粒后會破壞了四環素抗性基因（tetr）。

【1】A、自然界所有生物共有一套密碼子，A錯誤；

B、大腸桿菌和酵母菌都可進行基因轉錄，B錯誤；

C、大腸桿菌屬于原核生物，酵母菌屬于真核生物，由于大腸桿菌沒有膜結構的細胞器，無法對蛋白質進一步加工，故當受體細胞為大腸桿菌或酵母菌時，所形成的E蛋白結構不完全相同，C正確；

D、兩種受體細胞在基因表達時所遵循的堿基互補配對原則相同，D錯誤。

故選C。

【2】乙型腦炎病毒RNA經逆轉錄可得①cDNA；將E蛋白基因和N質粒連接需用②限制酶和DNA連接酶，故選D。

【3】根據表格分析，A類菌落在氨芐青霉素和四環素的培養基中都能夠生長，說明其導入的是N；B類菌落在氨芐青霉素的培養基中能生長，說明B菌落細胞被導入 EN 質粒；C類菌落在任何抗生素的培養基中都不能生長，說明其沒有導入任何質粒，兩種質粒中含有氨芐青霉素抗性基因（ampr）和四環素抗性基因（tetr），能表達產生相應的抗生素，但E蛋白基因的表達與兩種抗生素無關，因此ACD都能推出，B符合題意，故選B。

解答本題的關鍵是識記并理解基因工程的四個基本步驟，尤其是對核心步驟-構建基因表達載體步驟的理解，明確基因表達載體的幾個必須的成分及其作用，進而結合題干要求分析答題。