Question

【題目】科學家利用土壤農桿菌把編碼霍亂毒素的無毒性β鏈的基因轉移到苜蓿細胞，再將其培養成幼苗，食用這種苜蓿苗后，霍亂毒素β鏈很快被喉、腸胃等部位的分泌性粘液細胞吸收，刺激特異性抗體的大量產生，使機體獲得對霍亂的免疫。其具體過程如下：

（1）構建重組DNA分子常用的工具酶是 ，基因工程中構建基因表達載體的目的是 。

（2）圖中過程②采用的方法是 ，Ti質粒上有一個tms片段能促進生長素的大量合成，在對Ti質粒改造時要將該片段去除，其原因是 。

（3）該實驗中將農桿菌轉入苜蓿細胞的原生質體后，需再生細胞壁，實驗室檢測原生質體是否再生出細胞壁的方法是 。

（4）含目的基因的苜蓿細胞通過植物組織培養技術培養，經過 、 兩個重要階段能發育成幼苗。

Answer 1

【答案】（1）限制酶和DNA連接酶使目的基因在宿主細胞中穩定地復制并表達

（2）農桿菌轉化法防止植物（苜蓿）體內生長素濃度過高而抑制植物（苜蓿）生長

（3）將細胞置于高滲溶液中，觀察是否發生質壁分離

（4）脫分化再分化

【解析】

試題分析：（1）基因工程中常用的工具酶有限制酶和DNA連接酶。構建基因表達載體的主要目的是使目的基因在宿主細胞中穩定地復制并表達。

（2）圖中過程②是利用農桿菌將重組質粒導入植物細胞，這種方法稱為農桿菌轉化法。Ti質粒上有一個tms片段能促進生長素的大量合成，如果合成的生長素濃度過高會抑制植物（苜蓿）生長，所以在對Ti質粒改造時要將該片段去除。

（3）將細胞置于高滲溶液中，觀察是否發生質壁分離，是實驗室檢測原生質體是否再生出細胞壁的常用方法。

（4）植物組織培養技術包括脫分化和再分化過程。