Question

【題目】禽流感病毒為RNA病毒，可以侵入禽類細胞中進行增殖，還可以跨種間感染人與哺乳動物，如感染人的中樞神經系統，臨床表現為神經嗜性和高致病性。研究人員以野生型H9N2禽流感病毒為模式毒株，以小鼠為哺乳動物模型，在死亡小鼠體內分離出H9N2禽流感病毒，稱之為H9N2鼠適應性病毒。請回答問題：

（1）為研究H9N2鼠適應性病毒對小鼠的致病性，研究人員將一定量的H9N2鼠適應性病毒注入實驗組小鼠體內，同時分別將等量的_______________、H9N2禽流感模式病毒注入另外兩組小鼠作為空白對照和標準對照。接種后14天內每天觀察癥狀，記錄體重，小鼠體重下降超過30%則判定死亡，繪制小鼠存活率曲線：

結果表明：H9N2鼠適應性病毒感染小鼠后，與標準對照組相比，小鼠體重______________，存活率______________。說明_________________________________________。

（2）為研究H9N2鼠適應性病毒對中樞神經系統的感染性和其在中樞神經系統中的增殖能力，在感染后的第3天和第5天，剖殺小鼠收集腦組織，研磨處理后檢測上清液中病毒濃度的變化，繪制表格如下：

時間（天）	H9N2鼠適應性病毒濃度（pfu)
	實驗組	標準對照組
3	0.1	0
5	3.1	0

實驗結果表明H9N2鼠適應性病毒能夠侵染神經細胞并進行增殖，主要依據是_________。

（3）為進一步研究H9N2鼠適應性病毒對小鼠神經嗜性影響的關鍵基因片段。研究人員通過________獲得病毒的DNA分子，設計______________，通過PCR的方法獲得H9N2鼠適應性病毒的基因組，與H9N2禽流感模式病毒基因組進行比較，發現其中涉及到PB2蛋白基因的突變和HA蛋白基因的突變。

（4）為研究PB2蛋白突變基因的作用，研究人員構建了PB2蛋白基因突變的病毒，與野生型病毒分別侵染兩組小鼠，采用抗原一抗體雜交的方法統計PB2蛋白的含量如下表所示：

	2小時	4小時	6小時	8小時	10小時
野生型	-	-	+	+ +	+ +
突變型	-	+ +	+ + +	+ + + +	+ + + + +

（一表示未檢測出PB2蛋白，+表示PB2蛋白的沉淀量）

實驗結果表明：PB2蛋白基因的突變可以_____________PB2蛋白的合成。進一步研究發現，PB2蛋白含量與病毒在細胞中的增殖力呈正相關。

（5）為研究HA蛋白突變基因對病毒特異性侵染神經細胞的作用，你認為實驗組的最佳操作步驟應該為___________。

a.HA基因突變的病毒b.野生型病毒c.侵染小鼠d.侵染小鼠神經細胞培養液e.統計小鼠的存活率f.統計神經細胞的存活率 g.顯微鏡觀察神經細胞的形態變化

（6）根據上述研究結果推測，造成人類流感大流行的病毒可能由禽流感病毒進化而來，其原因是禽流感病毒通過______________的作用，能夠迅速適應新宿主并有效的感染和傳播。

Answer 1

【答案】 生理鹽水 下降 降低 與H9N2禽流感模式病毒相比，H9N2鼠適應病毒對小鼠的致病性更強 隨著時間的推移，小鼠腦神經細胞中H9N2鼠適應性病毒的濃度升高 逆轉錄 多個引物對 促進 adfgf 自然選擇（選擇）

【解析】本題以針對禽流感病毒的相關實驗為背景，考查的知識點有特異性免疫、基因工程、和探究性實驗設計和現象分析，意在考查考生能運用所學知識，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷。

（1）根據實驗目的設置的對照組是注入等量的生理鹽水；據圖中曲線變化可知，標準對照組小鼠的體重先下降后基本恢復至原來體重，而H9N2鼠適應性病毒感染的小鼠體重一直下降，且始終低于標準對照組；空白對照組和標準對照組小鼠在實驗后存活率均為100%，而H9N2鼠適應性病毒感染的小鼠存活率下降直到全部死亡；通過實驗對比說明，與H9N2禽流感模式病毒相比，H9N2鼠適應病毒對小鼠的致病性更強。

（2）根據表格數據比較可知，實驗組小鼠腦組織中有病毒，且隨著時間的推移，小鼠腦神經細胞中H9N2鼠適應性病毒的濃度在升高，說明H9N2鼠適應性病毒能夠侵染神經細胞并進行增殖。

（3）H9N2禽流感病毒為RNA病毒，可通過逆轉錄獲得病毒的DNA分子，設計多個引物對，通過PCR的方法獲得H9N2鼠適應性病毒的基因組。

（4）由表格數據分析可知，含PB2蛋白基因突變病毒的小鼠體內，PB2蛋白合成更快、更多，說明PB2蛋白基因的突變可以促進PB2蛋白的合成。

（5）根據實驗課題“研究HA蛋白突變基因對病毒特異性侵染神經細胞的作用”，實驗的自變量為有無HA蛋白突變基因的病毒，實驗組的操作為：用HA基因突變的病毒侵染小鼠神經細胞培養液，一段時間后統計神經細胞的存活率，并用顯微鏡觀察神經細胞的形態變化，統計神經細胞的存活率。

（6）禽流感病毒進化過程中，由于基因突變會產生可遺傳變異，在自然選擇作用下，能夠適應新宿主的病毒能有效的感染和傳播給人類，造成人類流感大流行。

[點睛]：本題屬于實驗類題型，解題關鍵是：1.設計實驗步驟：明確實驗課題，理解實驗原理，確定自變量和因變量，設置對照組和實驗組，控制無關變量，分析實驗現象得出結論；2.解讀題圖：對坐標圖的分析：a.先看橫、縱坐標，找出它們之間的關系；b.分析圖中每一條曲線的變化規律，并找出多條曲線之間變化的異同點；對表格數據分析：一是遵循實驗的對照原則和單一變量原則，看清數據的變化規律，如上升還是下降， 二是根據自變量分析數據變化原因，對于聯系教材的有關原理、概念等，盡可能用教材語言規范答題。