Question

【題目】萌發的小麥種子中淀粉酶活性較強，主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶．α-淀粉酶不耐酸、較耐熱，在pH為3.6以下迅速失活，而β-淀粉酶不耐熱，在70℃條件下15min后失活．某生物興趣小組設計了“測定小麥種子中α-淀粉酶催化效率”的實驗。

實驗材料：萌發3天的小麥種子（芽長約1cm）．主要試劑及儀器：麥芽糖標準液、5%淀粉溶液、斐林試劑、蒸餾水、恒溫水浴鍋等．

實驗步驟：

步驟一：制作麥芽糖梯度液．取7支干凈的具刻度試管，編號，按表加入試劑，再將試管置于60℃水浴中加熱2min，取出后按試管號順序排列。

步驟二：萌發3天的小麥種子制備淀粉酶溶液。

步驟三：將裝有淀粉酶溶液的試管 。

步驟四：另取四支試管，編號A、B、向A試管中加入2mL已經處理的酶溶液（忽略其中含有的少量麥芽糖），向B 試管加入等量蒸餾水，再同時置于40℃恒溫水浴中保溫10min，然后將A、B試管中的溶液分別加入5ml40℃的5%淀粉溶液，搖勻后繼續保溫10min．

步驟五：取A、B試管中反應溶液各2mL分別加入C、D試管，然后向C、D試管分別加入 ，再置于60℃水浴加熱2min后觀察顏色變化．

結果將C試管中顏色與 進行比較，獲得該試管中麥芽糖濃度，并計算出α-淀粉酶催化效率．

請分析回答：

（1）“步驟三”中補充的內容是______________________________．

（2）“步驟五”中補充的內容是______________________________．

（3）“結果分析”中補充的內容是________________________．

（4）步驟一的1、4、7試管中加入蒸餾水的量（X、Y、Z）分別是______________單位：ML）．

（5）實驗中B 試管起__________________作用，具體是檢測實驗使用的淀粉溶液是否存還原性糖。

（6）若要測定另一種淀粉酶的活性，則需要步驟_______________________進行改變。

Answer 1

【答案】置于70℃水浴中15min，取出后冷卻 2mL斐林試劑 第一步中獲得的麥芽糖顯色標準液 2.0mL、1.0mL、0mL 對照 三

【解析】

本題以圖表的形式考查酶的特性及鑒定實驗，旨在考查考生的信息獲取的能力與綜合運用能力，解題關鍵是明確兩種淀粉酶的作用特點及失活因素，進而作答。

（1）因為本實驗的目的是“測定小麥種子中α-淀粉酶的催化效率”，β-淀粉酶不耐熱，在70℃條件下15min后失活，以排除β-淀粉酶對實驗結果的干擾；

（2）步驟五：斐林試劑可在水浴加熱的條件下鑒定還原糖的存在，所以步驟五的做法中要補上2mL斐林試劑；

（3）結果將C試管中顏色與第一步中獲得的麥芽糖顯色標準液進行比較，以此獲得該試管中麥芽糖濃度，即可計算出α-淀粉酶催化效率；

（4）實驗設計要遵循對照原則和單一變量原則，所以各個試管中液體的總量要相等，則步驟一的1、4、7試管中加入蒸餾水的量（X、Y、Z）分別是2mL、1.0mL、0mL；

（5）實驗中B試管起對照作用，具體作用是檢測實驗使用的淀粉溶液中是否存在還原糖；

（6））若要測定另一種淀粉酶的活性，則需在步驟三進行改變，具體操作可以是將裝有淀粉酶溶液在pH調至3.6以下，使α-淀粉酶失活。