Question

【題目】科研人員利用基因工程技術獲得了耐儲存的轉基因番茄，其原理如下圖所示：

請回答下列問題。

（1）培育該轉基因番茄過程中，目的基因是___________，核心步驟是___________。若要迅速獲得大量目的基因，常用的技術是____________。

（2）重組質粒導入番茄細胞時，可以先讓番茄細胞經過脫分化得到愈傷組織，再把愈傷組織浸入到含有重組質粒的___________菌液中，通過該菌的___________作用使目的基因進入番茄細胞。這種方法往往需要將目的基因結合到___________上，并最終將目 的基因插入到番茄細胞的___________上。

（3）據圖分析，乙烯合成酶的反義基因與乙烯合成酶基因的異同是___________。

Answer 1

【答案】乙烯合成酶的反義基因 基因表達載體的構建 PCR 農桿菌 轉化 Ti質粒的了一DNA 染色體DNA 組成它們的堿基對排列順序都相同，但轉錄的模板鏈不同

【解析】

基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）培育該轉基因番茄過程中，目的基因是乙烯合成酶的反義基因，核心步驟是基因表達載體的構建。若要迅速獲得大量目的基因，常用的技術是聚合酶鏈式反應（PCR）。
（2）重組質粒導入番茄細胞時，可以先讓番茄細胞經過脫分化得到愈傷組織，再把愈傷組織浸入到含有重組質粒的農桿菌菌液中，通過該菌的轉化作用使目的基因進入番茄細胞。這種方法往往需要將目的基因結合到Ti質粒的T-DNA上，并最終將目的基因插入到番茄細胞的染色體DNA。
（3）乙烯合成酶的反義基因與乙烯合成酶基因的異同是組成它們的堿基對的種類、數量和排列順序都相同，但轉錄mRNA的模板鏈不同。