Question

【題目】請回答下列問題

（1）為了從土壤中篩選能有效降解有害有機化合物A的細菌，研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養基，成功地篩選出能高效降解化合物A的細菌（目的菌），從功能看該培養基為___________培養基，在對該菌進行分離、純化、計數過程中，常采用___________法接種。實驗過程中還需配制空白培養基作為對照，如果空白培養基中無菌落形成而實驗組培養基中形成的菌落如圖所示，造成這種結果的原因可能是___________。

（2）某植物富含果膠、淀粉、蛋白質和纖維素成分。在用該材料提取過果膠和淀粉后的剩渣加工飲料工藝研究中，將剩渣制成的汁液經蛋白酶和纖維素酶徹底酶解處理后，發現仍存在渾濁和沉淀問題，你將如何解決這一問題?____________________。在果汁生產中，為了提高果膠酶的使用效率和產品純度，一般需要將酶用___________法進行固定化處理。

（3）用凝膠色譜法提取分離血紅蛋白時，用_______________洗滌紅細胞，用___________破裂紅細胞使血紅蛋白得以釋放，如果裝填的凝膠色譜柱中出現氣泡，氣泡會___________，降低分離效果。

Answer 1

【答案】選擇 稀釋涂布平板 土壤中含有4種能降解有機物A的細菌或培養基不純含有其他碳源和氮源或接種過程被雜菌感染 在渾濁和有沉淀的汁液中加入果膠酶和淀粉酶 化學結合法或物理吸附法 生理鹽水 蒸餾水和甲苯 攪亂蛋白質的洗脫次序

【解析】

由題文描述可知：該題考查學生對微生物的實驗室培養、果膠酶在果汁生產中的作用與固定化酶、血紅蛋白的提取和分離等相關知識的識記和理解能力。

(1)由題意“成功地篩選出能高效降解化合物A的細菌（目的菌）”可知：從功能上看，用于篩選該“目的菌”的培養基為選擇培養基。純化微生物時常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法常用于對目的菌進行分離、純化、計數。實驗過程中配制空白培養基作為對照的目的是驗證培養基滅菌是否徹底或檢測培養基平板滅菌是否合格。如果空白培養基中無菌落形成而實驗組培養基中形成的菌落如圖所示，則造成這種結果的原因可能是：土壤中含有4種能降解有機化合物A的細菌；或者是培養基不純，含有其他碳源和氮源；或接種過程中被雜菌污染。

(2)依題意可知：導致渾濁和沉淀問題出現的原因是其汁液中仍存在少量果膠和淀粉，可見，為了解決這一問題，可在渾濁和有沉淀的汁液中加入果膠酶和淀粉酶。固定化酶是指用物理學或化學的方法將酶與固相載體結合在一起形成的仍具有酶活性的酶復合物。對于溶于水的果膠酶，一般采用化學結合法或物理吸附法將其固定在某種介質上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑，進而提高果膠酶的使用效率和產品純度。

(3)用凝膠色譜法提取分離血紅蛋白時，從采集的血樣中分離得到紅細胞液體后，再向其中加入五倍體積的生理鹽水對紅細胞進行洗滌。紅細胞釋放血紅蛋白，需加入蒸餾水和40%的甲苯，再在磁力攪拌器上充分攪拌10 min。裝填凝膠色譜柱時，若產生氣泡，則氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，從而影響分離效果。