Question

【題目】試回答下列“血紅蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)”的有關(guān)問題：

（1）血紅蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：_______、________、純化、__________。

（2）對紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌時應(yīng)使用生理鹽水而不使用蒸餾水的原因是______。

（3）圖1裝置的作用是________________________________。

（4）粗分離后純化蛋白質(zhì)采用的方法是___________法。裝填凝膠色譜柱時，色譜柱內(nèi)不能有氣泡的存在，原因是______。a、b均為蛋白質(zhì)分子，其中先從凝膠色譜柱中洗脫出來的是a，是因?yàn)?/span>a蛋白質(zhì)分子的相對分子質(zhì)量______（“大”、“小”）。

（5）圖2表示電泳法分離蛋白質(zhì)的結(jié)果。不同蛋白質(zhì)得以分離是原因是______。

Answer 1

【答案】樣品處理 粗分離 純度鑒定 防止紅細(xì)胞吸水漲破 去除血紅蛋白中的小分子雜質(zhì) 凝膠色譜 氣泡會攪亂洗脫液中的蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果 大 不同蛋白質(zhì)所帶的電荷性質(zhì)、分子大小和形狀等不同，導(dǎo)致電泳時遷移速度不同

【解析】

1、血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有：
（1）樣品處理：①紅細(xì)胞的洗滌，②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋白。
（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析。
（3）純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。
（4）純度鑒定SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。
2、紙層析法分離葉綠體中色素的原理：不同色素在層析液中的溶解度不同，隨層析液在濾紙條上的擴(kuò)散速度不同而將不同色素分離。

（1）血紅蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定。

（2）對紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌時應(yīng)使用生理鹽水而不使用蒸餾水的原因是防止紅細(xì)胞吸水漲破。

（3）圖1裝置的作用是去除血紅蛋白中的小分子雜質(zhì)。

（4）粗分離后純化蛋白質(zhì)采用的方法是凝膠色譜法。裝填凝膠色譜柱時，色譜柱內(nèi)不能有氣泡的存在，原因是氣泡會攪亂洗脫液中的蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。a、b均為蛋白質(zhì)分子，其中先從凝膠色譜柱中洗脫出來的是a，是因?yàn)?/span>a蛋白質(zhì)分子的相對分子質(zhì)量大，無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快。

（5）圖2表示電泳法分離蛋白質(zhì)的結(jié)果。不同蛋白質(zhì)得以分離是原因是不同蛋白質(zhì)所帶的電荷性質(zhì)、分子大小和形狀等不同，導(dǎo)致電泳時遷移速度不同。