Question

【題目】酵母菌是對青霉素不敏感的異養型生物，種類繁多，給人類生活帶來了許多益處。回答問題：

（1）制作果酒過程中，除將溫度控制在____________外，往往還需要先通氣，后密封，酒精發酵的反應方程式是_____________。

（2）在工業發酵時，培養酵母菌的培養基中需要添加青霉素，目的是_____________。

（3）酵母菌生長需要適宜的pH，因此在培養基配制過程中需要添加pH緩沖劑以維持pH相對穩定，原因是_____________。

（4）采用平板劃線法分離樣液中的酵母菌時，接種環需通過______________的方法滅菌，在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做是為了_____________。若經一段時間培養，發現有的線上長滿了菌落，有的線上無菌落，造成這種現象的原因可能是_____________（答出一項即可）。

Answer 1

【答案】18~25℃ +能量 抑制細菌等雜菌的生長 酵母菌培養過程中積累了大量代謝產物，導致pH下降 灼燒滅菌法 使聚集的菌體逐步減少，以便獲得單個酵母菌形成的菌落 劃線操作時接種環灼燒后未冷卻；未從上一次劃線末端開始劃線。

【解析】

1.微生物接種常用的兩種方法：

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過足夠稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后，可形成單菌落。

2.果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進行酒精發酵。溫度是酵母菌生長和發酵的重要條件，20℃左右，酒精發酵時，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發酵過程當中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。

（1）由分析可知：制作果酒過程中，除將溫度控制在18~25℃外，往往還需要先通氣，目的是讓酵母菌在有氧的條件下大量繁殖，而后密封是為了創造無氧條件，讓酵母菌進行無氧呼吸，酒精發酵的反應方程式是：+能量

（2）在工業發酵時，培養酵母菌的培養基中需要添加青霉素，目的是抑制細菌等雜菌的生長，保證酵母菌的更好的發酵條件。

（3）酵母菌生長需要適宜的pH，酵母菌培養過程中積累了大量代謝產物，導致pH下降，從而影響到酵母菌的生長，因此在培養基配制過程中需要添加pH緩沖劑以維持pH相對穩定。

（4）采用平板劃線法分離樣液中的酵母菌時，接種環需通過灼燒滅菌法進行滅菌；平板劃線操作的目的是為了通過多次劃線延伸，使菌種數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。因此在劃線操作中從第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做使聚集的菌體逐步減少，以便獲得單個酵母菌形成的菌落。劃線操作過程中，每次灼燒接種環后必須冷卻后再進行劃線，如果劃線操作時接種環灼燒后未冷卻或未從上一次劃線末端開始劃線，會導致有的線上長滿了菌落，有的線上無菌落的現象。