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乙病遺傳情況調查

注:每類家庭人數近200人。表中:“+”為發現乙病癥表現者，“-”為正常表現者

（1）據圖分析，甲病的遺傳方式為__________，判斷乙病的遺傳方式要根據系譜圖及表中的__________類家庭。Ⅲ3 的兩對等位基因均為雜合的概率為_________。

（2）若Ⅳ1 與一個正常男性結婚，則他們生一個只患乙病男孩的概率是__________。若Ⅳ4 與一個正常女性結婚，則他們生一個表現型正常的女孩，她是甲病基因攜帶者的概率__________。

（3）下列屬于遺傳咨詢范疇的有__________。

A．詳細了解家庭病史 B．推算后代遺傳病的再發風險率C．對胎兒進行基因診斷 D．提出防治對策和建議

（4）若Ⅰ1 同時患線粒體肌病（由線粒體 DNA 異常所致），則Ⅱ2、Ⅱ3__________（填“均患該病”、“ 均不患該病”或“無法確定”）。若Ⅲ2 同時患克氏綜合征，其性染色體為 XXY，其兩條 X 染色體分別來自外祖父和外祖母，說明Ⅲ2 患克氏綜合征的原因是__________。

（5）若乙病遺傳情況調查中共調查 1000 人（其中男 500 人，女 500 人），調查結果發現患者25 人（其中男 20 人，女 5 人），如果在該人群中還有 15 個攜帶者，則 b 基因的頻率是__________。

注：neor 是新霉素抗性基因；tk 基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質，導致細胞死亡。

（1）將目的基因和與細胞內靶基因同源的 DNA 片段都重組到__________上，構建打靶載體（基因表達載體）。

（2）打靶載體測序驗證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術將打靶載體導入胚胎干細胞，這樣打靶載體和與細胞內靶基因同源的區段就有機會發生同源重組。

（3）為了篩選發生同源重組的細胞，可在培養液中加入__________。最后還需要通過__________技術鑒定同源重組的細胞（去除靶基因），將這樣的細胞通過動物細胞培養后，獲得大量打靶成功的細胞。其中， 暫時不用的細胞進行__________保存。

（4）將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細胞”或“生殖細胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現基因完全被“修飾”過的小鼠。

A.酵母菌細胞中既有有氧呼吸酶也有無氧呼吸酶

B.果酒發酵裝置中，排氣口要和一個長而彎曲的膠管連接來防止雜菌污染

C.醋酸菌能在有氧條件下將果酒變成果醋，也可以在無氧條件下將葡萄糖變成果醋

D.果酒發酵時溫度應控制在18～25℃，果醋發酵時溫度應控制在30～35℃

A. B. C. D.

A.吞噬細胞和T細胞都能特異性識別抗原

B.吞噬細胞具有攝取處理和傳遞抗原的作用

C.若圖示表示細胞免疫，則T細胞將進行增殖分化

D.若圖示表示體液免疫，則T細胞將分泌淋巴因子

（1）過程Ⅰ將胚胎干細胞置于γ射線滅活的鼠胎兒成纖維細胞的飼養層上，并加入動物血清、抗生素等物質，維持細胞不 分化的狀態。在此過程中，飼養層提供干細胞增殖所需的_____，加入抗生素是為了_____。該過程對于研究 細胞分化和細胞凋亡的機理具有重要意義。

（2）過程Ⅱ將帶有遺傳標記的 ES 細胞注入早期胚胎的囊胚腔，通過組織化學染色，用于研究動物體器官形成的時間、發育過程以及影響因素，這項研究利用了胚胎干細胞具有_______的特點。在哺乳動物早期發育過程中，囊胚的后一個階段是____。囊胚不斷的擴大，從中伸展出的過程稱為___。

（3）過程Ⅲ是培育轉基因小鼠，將獲得的目的基因導入胚胎干細胞之前需構建基因表達載體，目的是_________________。將構建好的表達載體導入胚胎干細胞最常用的方法是____。

（4）過程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤里面全是軟骨、神經管、橫紋肌和骨骼等人類組織和器官。實驗時，必須去除小鼠的胸腺， 使其存在免疫缺陷，其目的是________，該過程研究的意義在于解決____問題。

（5）該研究中，包含的生物技術有____________(至少寫出 4 種)。

（1）圖示方法是____技術的應用，該技術的基礎是____技術。

（2）操作所用的成纖維細胞應傳代____代以內，誘導融合時需要加入的化學促融劑是____。

（3）人、鼠細胞先經過細胞融合形成________，再經過一次____，形成單核細胞。

（4）HAT培養基起____培養作用，培養時溫度應為____℃ ，操作中加入鳥本苷的目的是_____。

A.用 EcoRⅠ切割目的基因和質粒載體

B.用 BglⅡ和 EcoRⅠ切割目的基因和質粒載體

C.用 BglⅡ和 Sau3AⅠ切割目的基因和質粒載體

D.用 EcoRⅠ和 Sau3AⅠ切割目的基因和質粒載體

A. 單克隆抗體是由雜交瘤細胞合成和分泌的

B. 活化阿霉素能抑制細胞中的DNA復制和轉錄過程

C. 在治療中，應先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物導彈

D. 單克隆抗體特異性強，能減輕阿霉素對正常細胞的傷害

（1）重組質粒中終止子的作用是 ____________________。表中切割 DNA 后形成相同黏性末端的限制性內切酶是__________________，黏性末端為___________ 。

（2）過程③使用的限制性內切酶是 _________________。過程⑤需先用 LiAc 處理釀酒酵母細胞，其目的是 _________________________________ ，使細胞處于能吸收環境中DNA的狀態。

（3）結合圖示分析，進行工程菌篩選時，在含四環素的培養基上長出的菌落不一定是導入重組質粒的釀酒酵母，這是因為 _____________________________________ 。

（4）研究人員對篩選得到的兩種重組酵母(甲中導入啟動子 A，乙中導入啟動子 B)細胞中木酮糖激酶活力及發酵乙醇得率進行比較(發酵條件：1 L 15 g·L－1 的葡萄糖和 50 g·L－1 的木糖培養基中，120 h)結果如下表。

從木酮糖激酶酶活力分析，可以得出的結論是啟動子 A 的功能比啟動子B____，但本實驗中乙醇得率相差不大，其可能的原因是____。