Question

【題目】生活飲用水的微生物安全性日常檢測是很重要的。請回答下列問題：

（1）培養大腸桿菌所用的LB培養基一般用________法滅菌。檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣用_________進行一系列的梯度稀釋。

（2）將稀釋后的水樣分別接種到LB固體培養基，_______（填“正置/倒置”）于恒溫培養箱，在_____℃條件進行培養。用該方法統計樣本菌落數時_________（填“需要/不需要”）設置對照組。

（3）對于生活飲用水中大腸桿菌的數量統計，也可以采用濾膜法，該法是利用濾膜的直徑_______（填“大于/小于”）大腸桿菌的直徑，將大腸桿菌留在濾膜上進行的計數。

（4）下圖表示培養和純化大腸桿菌的部分操作步驟，下列相關敘述錯誤的是_____（多選）。

A．步驟①倒平板操作時，倒好后應立即將其倒過來放置

B．步驟②接種環火焰上灼燒后迅速蘸取菌液后劃線

C．步驟③多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養后出現單個菌落

D．步驟④恒溫培養箱培養后可用來對大腸桿菌進行計數

Answer 1

【答案】 高壓蒸汽滅菌 無菌水 倒置 37 需要 小于 ABD

【解析】試題分析：要驗證培養基是否滅菌徹底應設置一個空白對照，即將未接種的培養基放在適宜的條件下培養，若無菌落出現,則證明培養基滅菌徹底。由圖可知，①是倒平板，②是用接種環沾取菌液，③是進行平板劃線，④是培養。

（1）對培養基滅菌，一般都采用高壓蒸汽滅菌法。為了防止其他雜菌污染，在檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣用無菌水進行一系列的梯度稀釋。

（2）將稀釋后的水樣分別接種到LB固體培養基，倒置于恒溫培養箱，在37℃條件進行培養。用該方法統計樣本菌落數時需要設置對照組，主要是對比觀察是否有雜菌滋生。

（3）濾膜法統計生活飲用水中大腸桿菌的數量，是利用濾膜的直徑小于大腸桿菌的直徑，將大腸桿菌留在濾膜上進行的計數。

（4）步驟①倒完平板后立即蓋上培養皿，冷卻后將平板倒過來放置，有利于表面的水分更好的揮發和防止皿蓋上的水珠落入培養基造成污染，A錯誤；步驟②接種環火焰上灼燒后，應在火焰旁冷卻后再蘸取菌液后劃線，主要是防止高溫接種環殺死菌種，B錯誤；每次劃線前灼燒接種環是為了殺死上次劃線結束后，接種環上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數的增加，使每次劃線時菌種的數目逐漸減少，以便得到菌落，C正確；步驟④恒溫培養箱培養后不一定可用來對大腸桿菌進行計數，因為應選擇菌落數在30～300的平板進行計數，D錯誤。