Question

【題目】咪唑喹啉衍生物(BEZ)和長春花堿(VLB)兩種藥物常用于治療卵巢癌、肝癌等癌癥，為研究二者對腎癌的治療效果，研究人員進行了系列實驗。

(1)探究BEZ和VLB單獨及聯合使用對腎癌細胞凋亡的影響，結果如圖1所示。

該實驗的自變量是___________，實驗結果表明_____________。

(2)Caspase－3是細胞內促凋亡蛋白，Mcl－1是Caspase－3基因表達的調控因子。為研究BEZ和VLB治療腎癌的機制，研究人員對各組細胞進行實驗處理24小時后，檢測Mcl－1的mRNA和蛋白質含量，結果如圖2。

圖2中左圖與右圖GAPDH內參的化學成分_____(填“相同”或“不同”)。據圖2推測BEZ和VLB通過_____影響Mcl－1蛋白含量，進而使Caspase－3含量______ (填“升高”或“降低”)。

Answer 1

【答案】BEZ的濃度、VLB的濃度及不同濃度的組合 單獨使用BEZ和VLB對癌細胞凋亡無明顯影響，二者聯合使用促進癌細胞凋亡，且與濃度呈正相關 不同 抑制Mcl-1蛋白質的合成（翻譯）或促進Mcl-1蛋白質降解 升高

【解析】

1、動物細胞培養的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養。

2、細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。細胞數目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制時，細胞就會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的接觸抑制。

3、動物培養條件：

（1）無菌、無毒的環境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養液，以清除代謝廢物。

（2）營養物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質。

（3）溫度和PH：

（4）氣體環境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養液的PH。）

（1）該實驗的目的是探究BEZ和VLB單獨及聯合使用對腎癌細胞凋亡的影響，因此該實驗的自變量是BEZ的濃度、VLB的濃度及不同濃度的組合；根據圖形分析可知，實驗結果表明單獨使用BEZ和VLB對癌細胞凋亡無明顯影響，二者聯合使用促進癌細胞凋亡，且與濃度呈正相關。

（2）分析圖2電泳圖可知，左圖與右圖GAPDH內參的化學成分不同；據圖2推測BEZ和VLB通過抑制Mcl-1蛋白質的合成（翻譯）或促進Mcl-1蛋白質降解影響Mcl-1蛋白含量，進而使Caspase－3含量升高。