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【題目】回答下列與噬菌體侵染細菌實驗有關的問題:

I.1952年,赫爾希和蔡斯利用放射性同位素標記的新技術,完成了著名的噬菌體侵染細菌的實驗,下面是實驗的部分步驟:

(1)實驗的第一步用35S標記噬菌體的蛋白質外殼;第二步把35S標記的噬菌體與細菌混合。如上圖所示,第四步離心后的實驗結果說明:____________________

(2)若要大量制備用35S標記的噬菌體,需先用含35S的培養基培養________________,再用噬菌體去侵染_______________

Ⅱ.在赫爾希和蔡斯的噬菌體侵染細菌實驗中,用32P標記的噬菌體侵染大腸桿菌,在理論上,上清液中不含放射性,下層沉淀物中具有很高的放射性;而實驗的實際最終結果顯示:在離心后的上清液中,也具有一定的放射性,而下層的沉淀物放射性強度比理論值略低。

(1)在理論上,上清液放射性應該為0,其原因是_______________________________

(2)由于實驗數據和理論數據之間有較大的誤差,由此對實驗過程進行誤差

a.在實驗中,從噬菌體和大腸桿菌混合培養到用離心機分離,這一段時間如果過長,會使上清液的放射性含量升高,其原因是______________________________

b.在實驗中,如果有一部分噬菌體沒有侵染到大腸桿菌細胞內,將__________(填“是”或“不是”)誤差的來源,理由是_____________________

(3)噬菌體侵染細菌實驗證明了_______________

(4)上述實驗中,__________(填“能”或“不能”)用15N來標記噬菌體的DNA,理由是__________________________

【答案】侵染時,T2噬菌體的蛋白質外殼沒有進入細菌體內 大腸桿菌 35S的噬菌體 32P標記的是噬菌體的DNA,在侵染細菌時,理論上應將噬菌體的DNA全部注入細菌體內,離心后沉淀 部分含32P的噬菌體被細菌裂解釋放 32P的噬菌體沒有侵染細菌,離心后含32P的噬菌體會到上清液中 DNA是遺傳物質 不能 N元素在DNA和蛋白質中都含有

【解析】

噬菌體是病毒,無細胞結構,不能獨立生活,故對其進行標記需要先用含放射性的培養基培養大腸桿菌,再用噬菌體侵染被標記的大腸桿菌。

應該用特征元素35S來標記蛋白質外殼,用32PDNA進行標記。

Ⅰ(1)35S標記的噬菌體侵染未標記的大腸桿菌,保溫、攪拌、離心的結果,放射性主要存在于上清液中,說明蛋白質外殼未進入大腸桿菌細胞內。

2)要制備35S標記的噬菌體,應該先用含35S的培養基培養大腸桿菌,再用噬菌體侵染被標記的大腸桿菌,即可獲得帶35S標記的噬菌體。

Ⅱ用32P標記的噬菌體侵染大腸桿菌時,放射性主要集中在沉淀物中。

1)沉淀物中是較重的大腸桿菌,上清液是較輕的噬菌體。噬菌體侵染大腸桿菌時,只有DNA注入大腸桿菌體內,攪拌離心后未標記的蛋白質外殼在上清液中,被侵染的含32P的大腸桿菌在沉淀中。故理論上上清液放射性應該為0.

2a.若保溫時間過長,會部分含32P的噬菌體被細菌裂解釋放出來,進入上清液中,導致上清液放射性增強。

b. 若保溫時間過短,含32P的噬菌體沒有侵染細菌,離心后含32P的噬菌體會到上清液中,上清液的放射性也會增加,也會造成誤差。

(3)噬菌體侵染細菌的實驗證明了DNA是遺傳物質。

(4)該實驗中應該特征元素35S來標記蛋白質外殼,用32PDNA進行標記,因為S只存在于蛋白質中,P主要存在于DNA中,這樣可以對DNA和蛋白質進行分別標記。若用CHON進行標記,則會同時標記DNA和蛋白質,無法得出相應的結論。

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