Question

【題目】Ⅰ.如圖是以鮮蘋果汁為原料利用發酵瓶制作果酒和果醋的過程簡圖，分析并回答：

（1）過程甲中使用的微生物是__________。在鮮蘋果汁裝入發酵瓶時，要留有大約__________的空間。經過10～12天后，在酸性條件下用重鉻酸鉀檢測樣液，如果顏色變為__________色，說明產生了酒精。

（2）過程乙中使用的微生物是__________，可以從食醋中分離純化獲得，步驟如下：

第一步：配制固體培養基。

第二步：對培養基進行滅菌，其方法是______________________________。

第三步：接種。

第四步：培養。溫度控制在__________℃范圍內。

第五步：挑選符合要求的菌落。

（3）在__________________的條件下，如果缺少糖源，乙中的微生物將甲過程的產物變為__________，再將其變為__________。

Ⅱ.下表是某同學列出的分離土壤中微生物培養氈的配方，據此回答下列問題：

培養基配方
KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgS04·7H20	0.2g
葡萄糖	10.0g
尿素	1.0g
瓊脂	15.0g
將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

（1）該培養基中提供氮源的物質是___________，細菌能利用該氮源是由于體內能合成___________酶，將尿素分解成___________，使培養基的pH值___________（升高/降低）

（2）在對分離的能分解尿素的細菌進行鑒定時，還需在培養基中加入________________指示劑，若指示劑變___________，說明有目的菌株存在。

（3）為了測定微生物的數量，接種時應采用法，某同學在4個培養基上分別接種稀釋倍數為106的土壤樣液O.lmL，培養后菌落數分別為180、155、176、129個，則每毫升原土壤液中上述微生物的數量為___________，統計菌落數往往比實際活菌數___________（填“低”“高”“基本一致”），原因是___________。

Answer 1

【答案】 酵母菌 1/3 灰綠 醋酸(桿)菌 高壓蒸汽滅菌 30～35 氧氣充足（有氧） 乙醛 醋酸 【答題空10】尿素 脲(催化尿素分解的) 氨 升高 酚紅 紅 1.6×109 低 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

【解析】試題分析：據圖分析，甲表示果酒發酵，參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養兼性厭氧型；乙表示果醋發酵，參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養需氧型。根據表格分析，該培養基含有瓊脂，為固體培養基，含有的唯一氮源是尿素。能夠分解利用尿素的細菌，其細胞內含有脲酶，可以把尿素分解成氨，提供N源，進一步利用，只含有尿素作為N源的培養基對微生物具有選擇作用。

（1）根據以上分析已知，參與過程甲的微生物是酵母菌。在鮮蘋果汁裝入發酵瓶時，要留有大約1/3的空間，以防止發酵液溢出。經過10～12天后，在酸性條件下用重鉻酸鉀檢測樣液，如果顏色由橙色變為灰綠色，說明產生了酒精。

（2）乙是果醋發酵過程，參與果醋制作的微生物是醋酸（桿）菌。固體培養基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌；醋酸菌生存的適宜溫度是30-35℃，因此培養時要將溫度控制在30-35℃范圍內。

（3）在氧氣充足（有氧）的條件下，如果缺少糖源，醋酸菌可將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。

Ⅱ.（1）根據以上分析已知，該培養基以尿素為唯一氮源；細菌能利用該氮源是由于體內能合成脲酶，將尿素分解成氨，從而使培養基的pH值升高。

（2）在對分離的能分解尿素的細菌進行鑒定時，還需在培養基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，說明有目的菌株存在。

（3）純化微生物可以用稀釋涂布法和平板劃線法，其中稀釋涂布法能用于微生物的計數．1毫升原土壤樣液中上述微生物數量=（180+155+176+129）÷4×106×10=1.6×109個；用稀釋涂布平板法進行微生物的計數，但統計的數量比實際數量會偏少，原因是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。