Question

【題目】纖維素分子不能進入酵母細胞，為了使酵母菌能夠利用環境中的纖維素為原料生產酒精，構建了含3種不同基因片段的重組質粒．請據圖分析回答問題：

（1）由圖可知，目的基因有_____．

A．質粒 B．纖維素酶基因

C．信號肽基因 D．A基因

（2）獲取目的基因的方法一般包括_____和_____．

（3）本研究構建重組質粒時可選用四種限制酶，其識別序列如圖．為防止酶切片段的自身環接，可選用的限制酶組合是_____．

A．①②B．①③C．②④D．③④

（4）纖維素酶基因與質粒拼接起來需要_____酶．

（5）在以纖維素為唯一碳源的培養基上分別培養菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，不能存活的是菌株_____．

（6）利用纖維素生產酒精，菌株_____更具有優勢，其優勢在于_____．

Answer 1

【答案】BCD 從生物體細胞中分離 通過化學方法人工合成 B、C DNA連接 II Ⅳ Ⅳ分泌的纖維素酶固定于細胞壁，減少因培養液更新而造成的酶的流失，提高酶的重復利用率

【解析】

分析題圖：質粒為運載體，纖維素酶基因、信號肽基因和A基因屬于目的基因．菌株Ⅰ不能產生纖維素酶；菌株Ⅱ能產生纖維素酶，但不能分泌到細胞外；菌株Ⅲ、Ⅳ都能產生的纖維素酶，且都能分泌到細胞外，且菌株Ⅳ分泌的纖維素酶固定于細胞壁上。

（1）圖中質粒為運載體，纖維素酶基因、信號肽基因和A基因屬于目的基因，故選BCD。

（2）獲取目的基因的方法一般包括：從生物體細胞中分離、通過化學方法人工合成．

（3）為了防止酶切片段的自身環接，應該選擇兩種限制酶進行切割，且這兩種限制酶切割后形成的黏性末端不同．

A．①②切割后形成的黏性末端相同，因此仍可發生酶切片段的自身環接，A錯誤；

B．①③切割后形成的黏性末端不同，不能連接，這可防止酶切片段的自身環接，B正確；

C．②④切割后形成的黏性末端不同，不能連接，這可防止酶切片段的自身環接，C正確；

D．③④切割后形成的黏性末端相同，因此仍可發生酶切片段的自身環接，D錯誤。

故選BC。

（4）將目的基因與運載體連接起來需要DNA連接酶。

（5）由圖可知，Ⅱ產生的纖維素酶不能分泌到細胞外，Ⅲ、Ⅳ產生的纖維素酶能分泌到細胞外，則Ⅱ不能利用培養基上的纖維素，Ⅲ、Ⅳ能利用培養基上的纖維素．因此，在以纖維素為唯一碳源的培養基上分別培養菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，不能存活的是菌株II。

（6）由圖可知，與菌株Ⅲ相比，菌株Ⅳ分泌的纖維素酶固定于細胞壁，減少因培養液更新而造成的酶的流失，提高酶的重復利用率，因此菌株更具有優勢。