Question

【題目】取同種生物的不同類型細胞，檢測其基因表達，結果如圖1，回答下列相關問題．

（1）基因1～8中有一個是控制核糖體蛋白質合成的基因，則該基因最有可能是基因 ．
（2）圖所示細胞中功能最為近似的是細胞________
A.1與6
B.2與5
C.2與3
D.4與5
（3）判斷圖中細胞功能近似程度的依據是
（4）如圖2為三種質粒和一個含目的基因的片段的示意圖．圖中Ap為氨芐青霉素抗性基因，Tc為四環素抗性基因，lacZ為藍色顯色基因，EcoRⅠ（0.7Kb），PvuⅠ（0.8Kb）等為限制酶及其切割的位點與復制原點的距離，1Kb=1000個堿基對長度．請據圖回答：

①質粒A，C不能作為目的基因運載體的理由分別是、 ．
②將圖中的目的基因與質粒B進行重組，需要用到酶．如果是兩兩重組，可能有種長度的重組結果．
③在基因工程實驗的過程中，檢查目的基因是否重組到質粒中，也是一個重要的一步．現使用酶切重組質粒，完全酶切后，進行電泳檢測．若電泳圖譜中出現長度為1.1kb和kb，或者kb和kb的片段，則基本上可以判斷該重組質粒已與目的基因重組成功（重組質粒上目的基因的插入位點與EcoRⅠ的識別位點之間的堿基對忽略不計）．
④下列關于基因工程常用運載體﹣﹣質粒的說法正確的是（多選）
A．質粒通常是來自于細菌的環狀DNA分子，使用質粒運載體是為了避免目的基因被分解
B．質粒運載體只能在與目的基因重組后進入細胞
C．質粒上具有多種限制酶切點，以便于切割后與目的基因連接．沒有限制酶就無法使用質粒運載體
D．質粒運載體的復制和表達也遵循中心法則．

Answer 1

【答案】
（1）2
（2）A
（3）表達的相同基因最多，差異表達的基因最少
（4）缺少標記基因；復制原點被限制酶切割；限制酶（PvuⅠ）和DNA連接酶；3；EcoRⅠ酶；5.6；3.1；3.6；ACD
【解析】解：（1）幾乎所有細胞都含有核糖體，所以控制核糖體合成的基因幾乎在所有細胞都表達，因此基因1～8中，2基因最可能是控制核糖體蛋白質合成的基因．（2）1和6細胞表達的基因最為相似，所以1和6細胞功能最為近似．（3）1和6細胞表達的相同基因最多，差異表達的基因最少，所以兩者功能最為近似．（4）①由圖可知，質粒A中缺少標記基因，質粒C中的復制原點被酶切割，所以A、C不能作為運載體．②由圖可知，獲取目的基因使用的限制酶是PvuⅠ，所以切割質粒B也用該限制酶，同時目的基因與運載體連接的時候還需要DNA連接酶．用DNA連接酶連接時，可能出現質粒環化、目的基因環化、形成重組質粒，有3種長度的結果．③質粒長度為2.7kb，目的基因長度為4.0kb，所以重組質粒長度為6.7kb，出現長度為1.1kb，則使用EcoRⅠ酶切割的，另一個長度為5.6kb，若目的基因重組時倒置，可形成3.1kb和3.6kb的片段．④A、質粒通常是來自于細菌的環狀DNA分子，使用質粒運載體是為了避免目的基因被分解，A正確；
B、質粒運載體自身也能進入細胞，B錯誤；
C、質粒上具有多種限制酶切點，以便于切割后與目的基因連接．沒有限制酶就無法使用質粒運載體，C正確；
D、質粒運載體的復制和表達也遵循中心法則，D正確．
故選：ACD．
所以答案是：（1）2（2）A（3）表達的相同基因最多，差異表達的基因最少（4）①缺少標記基因 復制原點被限制酶切割②限制酶（PvuⅠ）和DNA連接酶 3③EcoRⅠ酶 5.6 3.1 3.6 ④ACD
【考點精析】關于本題考查的基因工程的原理及技術，需要了解基因工程的原理是利用DNA重組技術才能得出正確答案．