Question

【題目】研究人員從土壤中篩選獲得能降解苯酚的細菌菌株，以降解工業廢水中的苯酚，其主要步驟如圖所示。請回答下列問題：

(1)圖中②培養目的菌株的培養基中應以苯酚為唯一碳源，從功能上講，該培養基屬于________培養基。若要測定②中活細菌數量，采用的接種方法是__________________，這種方法統計的數據要比實際活菌的數目少，原因是___________。在顯微鏡下用血球計數板直接計數所得到的數目往往比實際活菌數目偏大，原因是__________________________________________。

(2)在接種到圖中⑥之前，隨機取若干滅菌后的空白平板先培養一段時間，這樣做的目的是______________________________________。

Answer 1

【答案】選擇 稀釋涂布平板法 當兩個或多個細胞連在一起時，在平板上觀察到的是一個菌落 顯微鏡直接計數法不能區分死菌與活菌 檢測平板滅菌是否合格

【解析】

本題考查細菌的分離與計數。從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養、梯度稀釋、涂布培養和篩選菌株。選擇分離過程中需要使用選擇培養基，做到全過程無菌操作。常用的固體培養基上的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法。題目中所篩選的細菌“只能”降解苯酚，故可采用以苯酚為唯一碳源的選擇培養基篩選，含除苯酚外其他碳源的培養基作為對照。

（1）在將樣品稀釋涂布到能鑒別降解苯酚的細菌的培養基之前，可通過選擇培養增加該細菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離出所需要的微生物，所以圖中②培養目的菌株的培養基以苯酚為唯一碳源，屬于選擇培養基；常用的微生物接種方法有稀釋涂布平板法、平板劃線法，若要統計活菌數目，最常用的方法是稀釋涂布平板法；稀釋涂布平板法統計的數據要比實際活菌的數目少，原因是當兩個或多個細胞連在一起時，在平板上觀察到的是一個菌落；顯微鏡直接計數法不能區分死菌與活菌，故統計數目往往比實際活菌數目大。

（2）在接種到圖中⑥之前，為了檢測平板滅菌是否合格，應隨機取若干滅菌后的空白平板先培養一段時間，觀察培養基上是否有菌落產生，若有則說明培養基已被污染，應重新配制。