Question

【題目】基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒，便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC—。根據圖判斷下列操作正確的是 （ ）

A．目的基因和質粒均用限制酶Ⅱ切割

B．目的基因和質粒均用限制酶Ⅰ切割

C．質粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

D．質粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

Answer 1

【答案】D

【解析】題圖顯示：目的基因的左側存在限制酶Ⅰ的識別序列，右側有限制酶Ⅱ的識別序列，而且限制酶Ⅱ的識別序列是限制酶Ⅰ識別序列的一部分，所以只有用限制酶Ⅱ才能將目的基因切割下來；若質粒用限制酶Ⅱ切割，則質粒上的兩種標記基因GeneI 和GeneⅡ都被破壞，造成重組質粒無標記基因；若用限制酶Ⅰ切割質粒，則GeneⅡ遭到破壞，GeneI的結構完好，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，均為GATC，可以連接形成重組DNA。綜上分析，質粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割，A、B、C三項均錯誤，D項正確。