Question

【題目】以小鼠腫瘤組織為實驗材料，開展了一系列生物學研究，回答下列問題：

（1）將獲得的腫瘤細胞培養液稀釋100倍后，用血細胞計數板（規格為2mm×2mm×0．1mm）計數，觀察到的計數室中細胞分布如圖。

①培養液中腫瘤細胞的密度是_____________。

②若在實驗操作時，用滴管從靜置的腫瘤細胞培養液中取樣稀釋后再計數，則得到的結果比實際值_____________。

（2）某同學要利用該腫瘤細胞建立腫瘤小鼠模型，在給小鼠接種腫瘤細胞前用射線照射小鼠的_____________器官，降低小鼠的_____________功能，以增加建模成功率。

（3）TdR（胸腺嘧啶核苷）是常用的一種DNA合成抑制劑。適當濃度的TdR就可阻斷DNA的正常復制，而不影響其他時期細胞的運轉。某瘤細胞X各時期經歷時間依次為G1期為10h、S期6h、G2期8h、M期1h。

科學家利用X細胞和TdR做了如下實驗，每組設置多個重復樣品。（統計各時期細胞數所占百分比的具體方法不做要求）

分組：A組：培養液+X細胞+TdR（用生理鹽水配置）

B組：……

第一步：培養19h后，檢測統計A、B兩組各時期細胞數所占百分比（第一次檢測）。

第二步：……

檢測統計：A、B兩組各時期細胞數所占百分比（第二次檢測）

①寫出B組添加試劑情況_____________

②設計一張表格記錄A、B兩組第一次檢測統計的結果，并將預期結果填入表中_____________

③科學家最終想要通過一系列處理使A組的所有細胞均處于G1和S期的交界處，以使細胞周期同步化，請將后續步驟補充完整。_____________

Answer 1

【答案】3．75×107個/mL 偏大或偏小 胸腺 細胞免疫 培養液+X細胞+生理鹽水

	G1	S	G2	M
A組	76%	24%	0%	0%
B組	40%	24%	32%	4%

將A組中的TdR全部洗去，更換新鮮培養液培養6h（6h-19h之間的任一時間均可），再向A組中加入TaR培養

【解析】

本題考查惡性腫瘤的防治，動物細胞與組織培養過程。動物細胞培養就是從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后，在適宜的培養基中，讓這些細胞生長和增殖。

（1）①培養液中腫瘤細胞的密度是：（5+6+6+6+7）÷80×400÷（2×2×0.1×10-3）×100=3．75×107個/mL。

②用滴管從靜置的腫瘤細胞培養液中取樣，如果取樣位置偏上，則得到的結果比實際值偏低；如果取樣位置偏下，則得到的結果比實際值偏高。

（2）由于胸腺是T淋巴細胞成熟的場所，給小鼠接種腫瘤細胞前用射線照射小鼠的胸腺器官，降低小鼠的細胞免疫功能，以增加建模成功率。

（3）①為了排除生理鹽水對實驗結果的影響，B組添加試劑情況為培養液+X細胞+生理鹽水。②設計一張表格記錄A、B兩組第一次檢測統計的結果，如下：

③科學家最終想要通過一系列處理使A組的所有細胞均處于G1和S期的交界處，以使細胞周期同步化，應補充的步驟：將A組中的TdR全部洗去，更換新鮮培養液培養6h（6h-19h之間的任一時間均可），再向A組中加入TaR培養。