Question

（08廣東卷）（《生物技術(shù)實踐》）

苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，①為土壤樣品。請回答下列問題：

 

（1）②中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入             作為碳源，②中不同濃度碳源的培養(yǎng)基        （A．影響；B．不影響）細(xì)菌的數(shù)量，如果要測定②中活細(xì)菌數(shù)量，常采用              法。

（2）④為對照，微生物在④中不生長，在⑤中生長，④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于            ；使用                 法可以在⑥上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)？

 

（3）如何比較不同菌株降解苯酚能力的大小？

 

（4）實驗過程中如何防止其它微生物的污染？

 

Answer 1

答案：

（1）苯酚　　A　　稀釋涂布平板法

（2）④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于④的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源，⑤培養(yǎng)基的中加入苯酚作為碳源。使用釋涂布平板法或平板劃線法可以在（6）上獲得單菌落。

采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時要倒置培養(yǎng)，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基。

（3）5支潔凈培養(yǎng)瓶→分別加入相同培養(yǎng)基（加等量的苯酚，用pH試紙檢測這5支瓶內(nèi)培養(yǎng)基的pH，用苯酚調(diào)試使之相等，苯酚是唯一的碳源）→分別接種5種等量的來自不同菌株的菌種→在相同的適宜條件下培養(yǎng)相同的時間→再用pH試紙檢測這5支瓶內(nèi)培養(yǎng)基的pH。

苯酚顯酸性，不同菌株的菌種降解苯酚的能力不同，5支瓶內(nèi)培養(yǎng)基中的苯酚被分解的量不同，所以pH不同。用pH試紙檢測這5支瓶內(nèi)培養(yǎng)基的pH，從而比較不同菌株降解苯酚能力的大小。

（4）從制備培養(yǎng)基到接種與培養(yǎng)等全部實驗過程要無菌操作：略。

解析：

（1）②中的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源，②中不同濃度的碳源A影響細(xì)菌數(shù)量，稀釋涂布平板法來測定②中活菌數(shù)目。

（2）④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于④的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源，⑤培養(yǎng)基的中加入苯酚作為碳源。使用釋涂布平板法或平板劃線法可以在（6）上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時要倒置培養(yǎng)，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基。

（3）5支潔凈培養(yǎng)瓶→分別加入相同培養(yǎng)基（加等量的苯酚，用pH試紙檢測這5支瓶內(nèi)培養(yǎng)基的pH值，用苯酚調(diào)試使之相等，苯酚是唯一的碳源）→分別接種5種等量的來自不同菌株的菌種→在相同的適宜條件下培養(yǎng)相同時間→再用pH試紙檢測這5支瓶內(nèi)培養(yǎng)基的pH.   苯酚顯酸性，不同菌株的菌種降解苯酚的能力不同，5支瓶內(nèi)培養(yǎng)基中的苯酚被分解的量不同，所以pH值不同。用pH試紙檢測這5支瓶內(nèi)培養(yǎng)基的pH值，從而比較不同菌株降解苯酚能力的大小。

（4）從制備培養(yǎng)基到接種與培養(yǎng)等全部實驗過程要無菌操作：  略。