Question

下圖（一）為某基因工程中利用的質粒筒圖，小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，amp^R為青霉素（抗生素）抗性基因，tct^R為四環素（抗生素）抗性基因，P為啟動因子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內的多種酶的酶切位點。下圖（二）為幾種酶作用于基因的位置。請回答下列問題：

（1）在基因工程中常用的工具有三種：一是用作切取目的基因的      酶；二是將目的基因與運載體拼接的       酶；三是作為運載體的質粒。

（2）將含有目的基因的DNA與經特定的酶切后的動載體（質粒）進行拼接形成重組DNA，理論上講，重組DNA可能有“          ”、“         ”、“         ”三種，其中有效的（所需要的）基因表達載體是         ，因此需要對這些拼接產物進行分離提純。

（3）利用圖（一）所示的質粒拼接形成的3種拼接產物（基因表達載體）與無任何抗藥性的原核宿主細胞接種到含四環素的培養基中，能生長的原核宿主細胞所含有的拼接產物（基因表達載體）是          。

（4）有效的基因表達載體成功導入受體細胞進行表達時，首先需要進行轉錄，RNA聚合酶識別和結合的位點是圖（一）中的       。在動物基因工程中，將基因表達載體導入受體細胞的常用方法是              。在植物基因工程中，將基因表達載體導入受體細胞的常用方法是              。是因為這種微生物很容易侵染到                

中，從而把它的Ti質粒上的              轉移到受體細胞染色體的DNA上。

（5）在基因工程中，作用于圖（二）所示a位置的酶是        ；作用于b位置的酶是

                  。

 

Answer 1

【答案】

（1）限制酶（限制性核酸內切酶）   DNA連接酶

   （2）目的—目的基因  目的基因—運載體   運載體—運載體   目的基因—動載體

   （3）運載體—運載體和目的基因—運載體

   （4）P（啟動子）   顯微注射法  農桿菌轉化法  雙子葉植物和裸子植物  T-DNA

   （5）限制酶（限制性內切酶）   DNA解旋酶。

【解析】略