Question

為了解基因結構，通常選取一特定長度的線性DNA分子，先用一種限制酶切割，通過電泳技術將單酶水解片段分離，計算相對大小；然后再用另一種酶對單酶水解片段進行降解，分析片斷大小。下表是某小組進行的相關實驗。

已知 一線性DNA序列共有5000bp（bp為堿基對）	第一步水解	產物（單位bp）	第二步水解	產物（單位bp）
	A切割酶	2100	將第一步水解分離后，分別用B酶切割	1900 200
		1400		800  600
		1000		1000
		500		500
	B酶切割	2500	將第一步水解產物分離后，分別用A酶切割	1900 600
		1300		800  500
		1200		1000 200
	經A酶和B酶同時切割	1900    1000    800     600    500    200

（1）由實驗可知，在這段已知序列上，A酶與B酶的識別序列分別為    個和    個。

（2）根據表中數據，請在下圖中標出相應限制性酶的酶切位點并注明相關片斷的大小。

（3）已知BarnH I與BglⅡ的識別序列及切割位點如下圖所示，用這兩種酶和DNA連接酶對一段含有數個BarnH工和BglⅡ識別序列的DNA分子進行反復的切割、連接操作，若干循環后            和             序列明顯增多。

Answer 1

（1）3   2

（2）

（3）—GGATCT—          —AGATCC—

     —CCTAGA—         —TCTAGG—