Question

【題目】牛奶中富含蛋白質，長期飲用有助于增強體質，但牛奶同時也是多種疾病的傳播載體．國家標準是每毫升牛奶中細菌數小于30000個．以下是牛奶消毒及細菌檢測實驗．
（1）圖1中步驟①稱為消毒法．中學實驗室對培養基進行滅菌的常用方法是 ．
（2）培養基中的蛋白胨可以為微生物提供水和碳源外，還應提供等基本營養成分．進行步驟③操作時，應選用圖2中的哪種工具進行涂布？ ． 為了避免雜菌污染，此步驟應在酒精燈附近進行．
（3）某同學采用稀釋涂布平板法統計菌落數目，菌落分布如圖3所示，推測該同學可能的操作失誤是 ．
（4）將接種后的培養基和作為對照的同時放入37℃恒溫培養箱中，培養36小時．取出后統計各平板的菌落數（如表），適于計數的平板菌落數一般需要在之間，經過消毒后的牛奶中，每毫升中細菌數大約是個．

牛奶稀釋倍數	10﹣2	10﹣3	10﹣4
平板1菌落數	87	10	1
平板2菌落數	83	12	1
平板3菌落數	85	10	0

Answer 1

【答案】
（1）巴氏；高壓蒸汽滅菌
（2）氮源、無機鹽；B；酒精燈火焰
（3）涂布不均勻
（4）未接種；30﹣300；8500
【解析】解：（1）圖中步驟①利用80℃、15min對牛奶進行巴氏消毒．對培養基滅菌常用高壓蒸汽滅菌法．（2）培養基的基本成分包括水、無機鹽、碳源和氮源，培養基中的蛋白胨可以為微生物提供碳源、水，因此還應提供氮源和無機鹽等基本營養成分．進行步驟③操作時，應選用涂布器，即圖B工具．為了避免雜菌污染，此步驟應在酒精燈火焰附近進行．（3）圖3中菌落集中在某一區域，其形成原因是涂布不均勻．（4）將接種后的培養基和作為對照的一個未接種的培養基同時放入37℃恒溫培養箱中，培養36小時．用稀釋涂布平板法測定同一樣品中的細菌數時，在每一個梯度濃度內，至少要涂布3個平板，確定對照組無菌后，選擇菌落數在30～300的進行記數，求其平均值，取出后統計各平板的菌落數，因此根據表格數據，應該選擇其中稀釋倍數為10﹣2的平板進行計數，經過消毒后的牛奶中，細菌數大約是=（87+83+85）÷3×102=8500個/mL． 所以答案是：（1）巴氏；高壓蒸汽滅菌；（2）氮源、無機鹽；B；酒精燈火焰；（3）涂布不均勻；（4）未接種；30﹣300；8500