Question

【題目】下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖甲、圖乙中標注了相關限制酶的酶切位點，其中切割位點相同的酶不重復標注。用圖中質粒和目的基因構建重組質粒，最宜選用哪兩種限制酶切割

A.BamHⅠ和HindⅢB.BclⅠ和HindⅢ

C.BamHⅠ和Sau3AⅠD.BclⅠ和Sau3AⅠ

Answer 1

【答案】B

【解析】

考查基因工程的原理。

構建重組DNA時一般采用用相同的限制酶切割目的基因和運載體以獲得相同的黏性末端便于目的基因和運載體的連接。本題考查用不同的限制酶分別切割運載體和目的基因進而構建重組DNA的方法。

由題知，選擇的限制酶應在目的基因兩端和質粒上均有識別位點，故排除Sau3A酶；BamHⅠ酶的切割位點位于質粒的四環素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因中間，若選用此酶切割會破壞這兩種抗性基因，影響后續重組質粒的篩選，故排除BamHⅠ酶，因此應選用BclⅠ和HindⅢ酶進行切割，故答案為B。

故選B。