Question

【題目】已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原。疫苗的生產和抗體的制備流程如下圖所示。請回答下列問題：

（1）過程①代表的是____________，過程③構建A基因重組載體時，啟動子和終止子是重新構建的，它們應該能被受體細胞的__________所識別，以便于其催化轉錄過程。

（2）上圖為A基因的結構示意圖，已知Ⅱ區的堿基數是2 000個，其中陰影區域堿基數是800個，空白區域中G和C的總數共有400個，則由該區域能指導蛋白質合成的片段轉錄產生的mRNA中A和U總數是________個。

（3）在給小鼠皮下注射A蛋白時，要重復注射幾次的目的是通過二次免疫，增加小鼠體內的______________數目。

（4）在將X進行擴大培養前，至少需要經過2次篩選，第一次是將____________________篩選出來，第二次是將____________________________篩選出來。

（5）對健康人進行該傳染病免疫預防時，可選用圖中基因工程生產的__________來制備疫苗。對該傳染病疑似患者確診時，可以從疑似患者體內分離出病毒與已知病毒進行核酸序列比較，或用圖中的__________________與分離出的病毒進行特異性檢測。

Answer 1

【答案】 逆轉錄 RNA聚合酶 400 漿細胞 雜交瘤細胞 能分泌所需抗體的雜交瘤細胞 A蛋白 抗A蛋白的單克隆抗體

【解析】試題分析：梳理基因工程的基本操作步驟、動物細胞融合技術、單克隆抗體、基因的結構及其轉錄等知識并形成知識網絡。在此基礎上，結合題意進行相關試題的解答。

(1)過程①表示以RNA為模板合成DNA的逆轉錄過程。 啟動子位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動基因轉錄出mRNA；終止子位于基因的尾端，具有終止轉錄的作用。因此過程③構建A基因重組載體時，重新構建的啟動子和終止子都應該能被受體細胞的RNA聚合酶識別。

(2) 依題意可知：A基因中能指導蛋白質合成的片段即空白區域共含有2000－800＝1200個堿基，其中C＋G＝400個，A＋T＝1200－400＝800個。依堿基互補配對原則，每條鏈上所對應的該片段中A＋T＝400個。因mRNA是由該區域的一條鏈為模板，按照堿基互補配對原則，通過轉錄產生，所以由該區域轉錄產生的mRNA中A和U總數是400個。

(3) A蛋白為主要抗原。給小鼠皮下反復注射A蛋白的目的是增強小鼠的免疫能力，使機體產生較多的漿細胞。

(4) 在制備單克隆抗體的過程中，需要兩次篩選。第一次是利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；第二次是利用專一抗體陽性檢測篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細胞。

(5)在預防接種時，可以利用A蛋白作為抗原制備疫苗；或者從疑似患者體內分離出病毒，與已知病毒進行核酸序列比較；或用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體進行特異性結合檢測。