Question

【題目】黑麥草具有抗除草劑草甘麟的能力，是因?yàn)楹邴湶輷碛芯幋a抗草甘麟酶的基因．科學(xué)家利用該基因．通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了抗除草劑草甘磷的玉米新品種．培育新品種過(guò)程中用到了PCR技術(shù)（如圖所示），請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法得到文庫(kù)，從中選取抗草甘磷酶的基因．該方法獲得的目的基因缺少基因表達(dá)所需的調(diào)控序列，即和 ．
（2）體外獲得大量編碼抗草甘麟酶的基因要利用PCR技術(shù)，該技術(shù)所依據(jù)的原理為 ， 圖中物質(zhì)A是 ， B酶是 ． PCR中A不能過(guò)短，主要原因是 ．
（3）加熱變性是使DNA雙鏈打開(kāi)，這一步是打開(kāi)鍵．在細(xì)胞內(nèi)斷此鍵用 酶．
（4）若需要對(duì)轉(zhuǎn)入抗草甘麟基因的玉米進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定，需要對(duì)玉米做實(shí)驗(yàn)．
（5）若實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想，為了提高抗草甘麟酶活性，可以通過(guò)工程設(shè)計(jì)和改造編碼抗草甘麟酶的基因．
（6）第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有A的DNA片段所占的比例為 ．
（7）PCR擴(kuò)增中，理論上要獲得等長(zhǎng)的DNA片段，至少要擴(kuò)增到第次．

Answer 1

【答案】
（1）cDNA；啟動(dòng)子；終止子
（2）DNA雙鏈復(fù)制；引物；Taq酶；過(guò)短，特異性差，會(huì)與模板隨機(jī)結(jié)合
（3）氫；解旋
（4）抗草甘麟接種
（5）蛋白質(zhì)
（6）
（7）三
【解析】解：（1）組織細(xì)胞中由于基因的選擇性表達(dá)，因此通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法得到是cDNA文庫(kù)，從中選取抗草甘磷酶的基因．由于mRNA是由基因的編碼區(qū)轉(zhuǎn)錄而來(lái)，該方法獲得的目的基因缺少基因表達(dá)所需的調(diào)控序列，即非編碼區(qū)的啟動(dòng)子和終止子．（2）PCR技術(shù)所依據(jù)的原理為DNA雙鏈復(fù)制，圖中物質(zhì)A是引物，B酶是Taq酶．PCR中引物不能過(guò)短，過(guò)短，特異性差，會(huì)與模板隨機(jī)結(jié)合．（3）加熱變性是使DNA雙鏈打開(kāi)，這一步是打開(kāi)氫鍵．在細(xì)胞內(nèi)斷氫鍵用解旋 酶．（4）若需要對(duì)轉(zhuǎn)入抗草甘麟基因的玉米進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定，需要對(duì)玉米做抗草甘麟接種實(shí)驗(yàn)．（5）若實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想，為了提高抗草甘麟酶活性，可以通過(guò)蛋白質(zhì)工程設(shè)計(jì)和改造編碼抗草甘麟酶的基因．（6）由圖可知，由原來(lái)的每條母鏈為模板合成的兩個(gè)新DNA分子中，只含有引物A或另一種引物，而以新合成的子鏈為模板合成新DNA分子時(shí)，兩種引物都含有，第四輪循環(huán)共產(chǎn)生16個(gè)DNA分子，其中含有引物A的分子是15個(gè)，占 ．（7）由圖示可知，第一、二輪循環(huán)合成的子鏈長(zhǎng)度均不同，根據(jù)半保留復(fù)制特點(diǎn)可知，前兩輪循環(huán)產(chǎn)生的四個(gè)DNA分子的兩條鏈均不等長(zhǎng)，第三輪循環(huán)產(chǎn)生的DNA分子存在等長(zhǎng)的兩條核苷酸鏈，如分析中的圖示． 所以答案是：（（1）cDNA；啟動(dòng)子；終止子；（（2）DNA雙鏈復(fù)制；引物；Taq酶 過(guò)短，特異性差，會(huì)與模板隨機(jī)結(jié)合；（（3）氫；解旋；（（4）抗草甘麟接種；（5）蛋白質(zhì)；（6） ；（7）三
【考點(diǎn)精析】認(rèn)真審題，首先需要了解基因工程的原理及技術(shù)(基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù))，還要掌握蛋白質(zhì)工程(蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求)的相關(guān)知識(shí)才是答題的關(guān)鍵．