Question

【題目】最新調查顯示手機每平方厘米就駐扎了12萬個細菌，這個數字足以令馬桶坐墊上的細菌隊伍汗顏。某生物興趣小組的同學，利用手機表面的細菌進行了相關的培養研究。

（1）培養微生物的培養基一般含有的成分有________，另外還需滿足PH、營養物質以及對氧氣的需求。

（2）若想獲取不同菌的菌落形態，需要固體培養基培養，培養基配置的基本步驟有：計算→________。上述操作完成待培養基冷卻凝固后需將平板倒置，這樣做的目的是________。

（3）為研究手機表面微生物的種類，用稀釋涂布平板法進行細菌的純化和分離。下面的四種菌落分布情況中，哪些選項是通過稀釋涂布平板法得到的________。

（4）研究小組用瓊脂擴散法測定玫瑰精油對手機表面細菌的抑制情況。該方法的操作步驟如下：首先制備牛肉膏蛋白胨平板，用涂布器將5種細菌分別接種到5個平板上，得到細菌平板。然后制備直徑為5mm 的濾紙圓片，采用________滅菌法處理，將滅菌的濾紙片分別放入________中浸泡10min，后將濾紙片放在5個細菌平板表面。最后將平板放入________中倒置培養48小時。通過測量________來檢測玫瑰精油對5種細菌的抑制效果。

Answer 1

【答案】水、碳源、氮源、無機鹽 稱量、溶化、滅菌、倒平板 避免水分蒸發過快，防止皿蓋上的冷凝水落入培養基造成污染 ABC 干熱 適宜濃度的玫瑰精油和無菌水 恒溫培養箱 透明圈的直徑（抑菌圈的直徑）

【解析】

1、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經溶化的培養基倒入培養皿制成平板、劃線接種、在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過適量稀釋后，均勻涂布在固體培養基表面，經培養后可形成單個菌落。

2、常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

（1）培養微生物的培養基一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，在除上述幾種主要營養物質的基礎上，培養基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求。

（2）制備固體培養基的基本步驟有：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。等平板冷卻凝固后，應將平板倒置，這樣做的目的是，防止培養基冷卻過程中形成的水滴落到培養基表面對培養基造成污染。

（3）由圖和分析可知，A、B、C為通過稀釋涂布平板法得到的菌落，D為通過平板劃線法得到的菌落。

（4）為保持濾紙的干燥，滅菌時應用干熱滅菌法，不宜采用高壓蒸汽滅菌法。將滅菌的濾紙片分別放入適宜濃度的玫瑰精油和無菌水中（對照）浸泡10min，再將濾紙片放在5個細菌平板表面，最后將平板放入恒溫箱中倒置培養48h，防止培養皿蓋上凝結的水珠滴落造成污染。通過測量透明圈直徑(抑菌圈直徑)可判斷玫瑰精油對5種供試細菌的抑制效果，抑菌圈越大，說明抑制作用越強。