Question

【題目】某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養基，成功篩選到能高效降解化合物A的細菌（目的菌）。實驗的主要步驟如下圖所示。請分析回答下列問題。

（1）培養基中加入化合物A的目的是__________，這種培養基屬于_________培養基。

（2）目的菌生長所需的氮源和碳源是來自培養基中的____________。實驗需要振蕩，培養，由此推測“目的菌”的代謝類型是_______。

（3）對培養基進行滅菌的常用是_______方法。用稀釋涂布平板法測定密度時，實際活菌數要比測得的數目__________。

（4）某同學計劃統計污水池中“目的菌”的總數，他選用10-4、10-5、10-6稀釋液進行平板劃線，每種稀釋液都設置了3個培養皿。從設計實驗的角度看，還應設置的一組對照實驗是______________，此對照實驗的目的是____________________________。

（5）培養若干天后，應選擇培養瓶中化合物A含量_______的培養液，接入新的培養液中連續培養，使目的菌的數量_______（兩空選填增加或減少）

（6）實驗結束后，使用過的培養基應該進行_______處理才能倒掉，這樣做的目的是防止造成_______________。

（7）有同學將“目的菌”破碎并提取得到該菌蛋白質，利用凝膠過濾法分離蛋白質（如圖），他在操作中加樣的正確順序是______________。

Answer 1

【答案】篩選目的菌 選擇 化合物A 異養需氧型 高壓蒸汽滅菌法 高 不接種的空白培養基 證明培養基制備過程中是否被雜菌污染 減少 增加 滅菌 對環境的污染 4→1→2→3

【解析】

培養基的成分：水、碳源、氮源、無機鹽和生長因子等。

培養基按功能可分為選擇培養基和鑒別培養基。

常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

常用的滅菌方法：干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法和灼燒滅菌法。

凝膠色譜法：指根據相對分子質量的大小分離蛋白質的有效方法。

（1）該實驗是為了篩選可以分解化合物的細菌，故培養基中加入化合物A是為了篩選目的菌，該培養基屬于選擇培養基。

（2）培養基中的化合物可以為目的菌提供生長所需的氮源和碳源。實驗需要振蕩，培養，由此推測“目的菌”需要氧氣，又因為它可以分解有機物A，故其代謝類型是異養需氧型。

（3）對培養基常采用高壓蒸汽滅菌法處理。用稀釋涂布平板法測定密度時，因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，故實際活菌數要比測得的數目多。

（4）某同學計劃統計污水池中“目的菌”的總數，他選用10-4、10-5、10-6稀釋液進行平板劃線，每種稀釋液都設置了3個培養皿。從設計實驗的角度看，還應設置的一組不接種的空白培養基作為對照實驗，通過觀察該培養基是否有菌落產生來判斷培養基制備過程中是否被雜菌污染。

（5）培養若干天后，應選擇培養瓶中化合物A含量減少的培養液（說明其中含有能分解化合物的微生物），接入新的培養液中連續培養，增加目的菌的數量。

（6）實驗結束后，為了避免污染環境，使用過的培養基應該進行滅菌處理才能倒掉。

（7）凝膠色譜中樣品的加入和洗脫：用吸管小心吸取1ml透析后的樣品，加到色譜柱的頂端，加樣后，打開下端出口，使樣品滲入凝膠床內，等樣品完全進入凝膠層后，關閉下端出口。加入磷酸緩沖液，連接緩沖液洗脫瓶打開下端出口進行洗脫。故對應的加樣順序是：4→1→2→3。