Question

【題目】小鼠是繼果蠅之后的又一種模式動物，下圖1表示生產長效胰島素轉基因小鼠培育過程示意圖，圖2表示圖1中③表達載體構建過程圖示。請回答下列問題：

（1）圖1中的過程①注射A物質的目的是使供體母鼠__________________，若進行體外受精，則需將未成熟的卵子培養至_______________才具備受精能力。

（2）在圖2中，當目的基因的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后反應管中有________種DNA片段，經過程⑧形成的重組質粒上將有______________限制酶的切點。

（3）為確保目的基因在小鼠細胞中進行表達，圖2的⑧過程在構建基因的表達載體時，需將目的基因插在____________________之間，將表達載體送入細胞時，圖1中的過程④常用的方法是__________________。

（4）為檢測是否含有目的基因，通常采用的方法是______________。為檢測目的基因是否成功表達，通常采用的方法是____________________。

Answer 1

【答案】（1）超數排卵 減數第二次分裂中期（或MⅡ中期）

（2）4 HindⅢ（或1種）

（3）啟動子、終止子 顯微注射法

（4）DNA分子雜交技術 抗原-抗體雜交技術

【解析】

試題分析：（1）分析圖1可知：過程①注射的A物質是促性腺激素，其目的是使供體母鼠超數排卵；進行體外受精時，未成熟的卵子需培養至減數第二次分裂中期（或MⅡ中期）才具備受精能力。

（2）在圖2中，目的基因的DNA含有1個HindⅢ酶切位點，2個BamHⅠ酶切位點，因此當該目的基因的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后反應管中有4種DNA片段。用限制酶HindⅢ酶、BamHⅠ切割獲得目的基因，用限制酶HindⅢ酶、BclⅠ切割獲得質粒，因BamHⅠ和BclⅠ酶切獲得的黏性末端相同，因此經過程⑧形成的重組質粒上將有HindⅢ的切點，沒有BamHⅠ和BclⅠ的切點。

（3）為確保目的基因在小鼠細胞中進行表達，圖2的⑧過程在構建基因的表達載體時，需將目的基因插在啟動子和終止子之間，將表達載體導入動物細胞常用的方法是：顯微注射法。

（4）為檢測是否含有目的基因，通常采用DNA分子雜交技術；為檢測目的基因是否成功表達，通常采用的方法是抗原-抗體雜交技術。