Question

【題目】生物技術與社會現象、生產實際聯系密切，請回答下列關于生物技術實踐的問題。

（1）在果酒果醋的自然發酵過程中，酵母菌的來源是 ，發酵裝置內加入果汁后要留出約1/3的空間，目的是 。酒精發酵后轉入醋酸發酵前，除改變溫度外，還需調整的發酵條件是 。

（2）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的基因轉入酵母菌中，經篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種：

圖一中的②、③過程需重復幾次，目的是進一步 。某同學嘗試過程③的操作，其中一個平板經培養后的菌落分布如圖二所示，推測該同學接種時可能的操作失誤是 。

（3）制備固定化酵母細胞時要將干酵母活化，并將溶化好的 溶液冷卻至室溫，加入已活化的酵母細胞，進行充分攪拌，使其混合均勻，再轉移至注射器中，以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的 溶液中，觀察凝膠珠的形成。

（4）DNA粗提取與鑒定實驗中，對最后得到絮狀物進行鑒定時，先取兩支試管，分別加入等量的2mol/L的NaCl溶液溶解絮狀物，再向試管中各加入4mL二苯胺試劑，混合均勻，后續進一步的操作是 ，比較兩支試管中溶液的顏色。

Answer 1

【答案】（1）附著在果皮上的野生型酵母菌 有利于酵母菌有氧呼吸并進行快速繁殖；防止發酵過程中產生二氧化碳造成發酵液溢出 通入無菌空氣

（2）篩選純化獲得分解淀粉能力強的酵母菌 涂布不均勻

（3）海藻酸鈉 氯化鈣

（4）將試管置于沸水中加入5分鐘（等冷卻后）

【解析】

試題分析：（1）果酒發酵的菌種來自于附著在果皮上的野生型酵母菌。酵裝置內加入果汁后要留出約1/3的空間，這樣有利于酵母菌有氧呼吸并進行快速繁殖，還可以防止發酵過程中產生二氧化碳造成發酵液溢出。醋酸菌是好氧菌，所以酒精發酵后轉入醋酸發酵前，除改變溫度外，還需通入無菌空氣。

（2）圖一中②、③過程重復幾次的目的是純化獲得分解淀粉能力強的酵母菌。由圖二可知，該同學采用的是稀釋涂布平板法，但菌落比較集中，沒有很好的分散開來，可能是涂布不均勻導致的。

（3）溶化好的海藻酸鈉溶液必須冷卻至室溫，才能加入細胞，否則高溫會殺死酵母菌。將海藻酸鈉和酵母菌的混合液轉移到注射器中，并以恒定的速度緩慢地注射到氯化鈣溶液中，以形成凝膠珠。

（4）DNA鑒定時，加入二苯胺后需要水浴加熱才能觀察到藍色。