Question

【題目】（三）回答下列有關(guān)生物技術(shù)與基因表達(dá)的問(wèn)題

如圖所示為利用現(xiàn)代生物技術(shù)獲得能表達(dá)某蛋白酶工程菌的過(guò)程及工程菌表達(dá)目的基因的模式圖。選用的質(zhì)粒A上有I、II、III、IV四種限制酶切割位點(diǎn)。

【1】據(jù)圖推斷過(guò)程①獲取目的基因時(shí)，應(yīng)選用的限制酶是______________。過(guò)程②是利用___________酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組質(zhì)粒。過(guò)程③為重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，如受體細(xì)胞為小鼠受精卵，則選用的常規(guī)方法是_______________。

【2】如同時(shí)用酶I和酶IV切割圖中質(zhì)粒A，產(chǎn)生1.8kb和8.2kb的兩種片段（1kb=1000對(duì)堿基對(duì)），如用四種酶同時(shí)切割質(zhì)粒A，則產(chǎn)生0.6kb和8.2kb兩種片段，那么用同時(shí)用酶II和酶IV切割質(zhì)粒A，則產(chǎn)生的片段有____________。

【3】過(guò)程⑤表示______________過(guò)程，其需要的原料是_______________。如表列舉了是幾種氨基酸的密碼子。

據(jù)此推斷圖13中合成的多肽，其前三個(gè)氨基酸依次是_______________

A. 甲硫氨酸 丙氨酸 絲氨酸 B. 酪氨酸 精氨酸 精氨酸

C. 甲硫氨酸 絲氨酸 丙氨酸 D. 酪氨酸 精氨酸 丙氨酸

【4】獲得此蛋白酶后，利用酶的固定化技術(shù)能回收和重復(fù)利用此蛋白酶，以下屬于固定化技術(shù)中的載體結(jié)合法的是_______________

Answer 1

【答案】

【1】II和IIIDNA連接酶顯微注射

【2】1.2kb和8.8kb

【3】轉(zhuǎn)錄四種游離的核糖核苷酸A

【4】B

【解析】據(jù)圖分析，①表示目的基因的獲取，②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，④表示目的基因的檢測(cè)與表達(dá)，⑤表示轉(zhuǎn)錄過(guò)程。

【1】目的基因上Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的切割位點(diǎn)，質(zhì)粒上有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的切割位點(diǎn)，切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA需要相同的限制酶，但是目的基因上有Ⅰ切割位點(diǎn)，所以應(yīng)該選用Ⅱ、Ⅲ切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA；過(guò)程②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，需要DNA連接酶將目的基因與質(zhì)粒相連。過(guò)程③表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞的過(guò)程，若受體細(xì)胞是動(dòng)物的受精卵，一般用顯微注射法。

【2】質(zhì)粒同時(shí)用I和酶IV酶切，產(chǎn)生1.8kb和8.2kb的兩種片段，說(shuō)明質(zhì)粒上含有10kb個(gè)堿基對(duì)。用以上四種酶同時(shí)切割此質(zhì)粒，則產(chǎn)生0.6kb和8.2kb的堿基兩種片段，則說(shuō)明Ⅰ和Ⅱ、Ⅱ和Ⅲ、Ⅲ和IV切割位點(diǎn)間的片段都是0.6kb，那么用同時(shí)用Ⅱ和IV酶切，則產(chǎn)生的片段有0.6+0.6=1.2kb和0.6+8.2=8.8kb。

【3】過(guò)程⑤表示轉(zhuǎn)錄過(guò)程，模板是DNA 的一條鏈，原料是四種游離的核糖核苷酸。如表列舉了是幾種氨基酸的密碼子。

【4】圖中mRNA上的堿基序列是AUGGCUUCUUUC，其中AUG是起始密碼子，決定的甲硫氨酸；GCU決定的是丙氨酸；UCU決定的是絲氨酸，即決定的前三個(gè)氨基酸是甲硫氨酸、丙氨酸、絲氨酸。