Question

【題目】馬鈴薯含有豐富的淀粉、氨基酸、多種維生素和無機鹽，是種植廣泛的農作物。侵染病毒后導致產量大幅下降，培育脫毒和抗毒的馬鈴薯品種是提高產量的有效方法。請回答下列問題：

（1）利用馬鈴薯的莖尖進行離體培養可以獲得脫毒苗，原因在于____________________，該過程依據的原理是_________________________________。

（2）為獲得抗病毒的馬鈴薯植株，往往采用轉基因技術，將病毒復制酶基因轉移到馬鈴薯體內。其過程大 致如圖所示：

①構建基因表達載體過程中需要用__________（酶）處理。目的基因轉錄過程中，__________能使轉錄在所需要的地方停止下來。

②將目的基因導入馬鈴薯細胞使用了__________法，要用__________處理土壤農桿菌，使之轉變為感受態，然后將它們在緩沖液中混合培養以完成轉化過程。

③目的基因導入馬鈴薯細胞后，是否可以穩定維持和表達，要通過檢測與鑒定，馬鈴薯的DNA上是否插入了目的基因的檢測方法是____________________。

（3）生產上常將上述轉基因作物與非轉基因作物混合播種，其目的是降低病毒的__________基因頻率的增長速率。

Answer 1

【答案】莖尖病毒極少甚至無病毒（植物）細胞具有全能性限制酶（或限制性核酸內切酶）和DNA連接酶終止子農桿菌轉化Ca2+DNA分子雜交技術抗性

【解析】

植物組織培養過程是：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養依據的原理是植物細胞的全能性。目的基因導入植物細胞常用的方法是農桿菌轉化法，該方法比較經濟有效，還有基因槍法和花粉管通道法；目的基因導入動物細胞常用的方法是顯微注射法；大腸桿菌細胞最常用的轉化方法就是用鈣離子處理細胞，使細胞的生理狀態發生改變，完成轉化過程。

（1）馬鈴薯莖尖病毒極少甚至無病毒，可以用來培養脫毒苗，植物組織培養依據的原理是植物細胞的全能性。

（2）①構建基因表達載體，需要的工具酶有限制性核酸內切酶和DNA連接酶，基因表達載體中的終止子使轉錄在所需要的地方停止下來。

②將外源基因導入植物體內用農桿菌轉化法，用Ca2+處理土壤農桿菌，使之轉變為感受態，使外源基因容易導入。

③DNA上是否插入了目的基因的檢測方法是DNA分子雜交技術。

（3）轉基因作物與非轉基因作物混合播種，可降低抗性作物對害蟲的選擇性，使害蟲種群中的抗性基因頻率增長率減慢。