Question

【題目】尿素是一種重要的農業氮肥，但若不經細菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數量繁多，同學們試圖篩選出能高效降解尿素的細菌．設計了“土壤中分解尿素細菌的篩選與計數實驗”，過程如圖所示：
（1）在接種前，進行①～⑤系列操作的意圖是 ． 據題意，每次為使菌液稀釋10倍，應加入的無菌水量是mL．
（2）為達到實驗目的，本實驗所配置的培養基成分不應包括（填入下列序號）；原因是 ． 制備該無菌培養基的步驟為“計算→稱量→溶解→滅菌→倒平板”，其中調節pH應該在（填步驟名稱）之前． ①水②無機鹽（不含氮） ③NH4 NO3④尿素⑤葡萄糖⑥牛肉膏⑦蛋白胨⑧瓊脂
（3）本實驗采用的接種工具是 ． 微生物的不同接種技術的操作方法各不相同，但其核心都是 ．
（4）某同學接種了3個培養皿，一段時間后三個培養皿中分別長出了54個，46個，50個菌落，根據實驗結果，該1g土壤樣本中約有分解尿素的細菌個．

Answer 1

【答案】
（1）使菌液按一定的梯度稀釋；9
（2）③、⑥、⑦；培養基中只有以尿素為唯一的氮源，才能起到選擇作用；滅菌
（3）涂布器；防止雜菌污染
（4）5×107
【解析】解：（1）在接種前，進行①～⑤系列操作的意圖是使菌液按一定的梯度稀釋．根據題意，為使菌液稀釋10倍，菌液取1mL，則每次應加入的無菌水量是9mL．（2）微生物培養基的成分主要包括碳源、氮源、水、無機鹽，碳源選擇⑤葡萄糖；要篩選能夠分解尿素細菌，需要加入④尿素作為唯一氮源；對細菌進行計數時需要利用稀釋涂布平板法，因此需要在培養基中加入⑨瓊脂作為凝固劑；另外①水和②無機鹽（不含氮）是培養基必需的．因此，為達到實驗目的，本實驗所配置的培養基成分不應包括③、⑥、⑦； 培養基配置的基本過程：計算、稱量、溶化、調pH、滅菌、倒平板五個步驟，即調pH值應該在滅菌之前．（3）為能夠進行菌落計數，本實驗應采用稀釋涂布平板法，接種工具為涂布器．微生物的不同接種技術的操作方法各不相同，但其核心都是防止雜菌污染． （4）根據圖解可知，對菌液進行稀釋時共稀釋了106倍，乙同學分別接種了3個培養皿，一段時間后三個培養皿中分別長出了54個、46個、50個菌落，根據甲的實驗結果，該1g土壤樣本中約有分解尿素的細菌=（54+46+50）÷3×106=5×107個． 所以答案是：（1）使菌液按一定的梯度稀釋 9（2）③、⑥、⑦ 培養基中只有以尿素為唯一的氮源，才能起到選擇作用 滅菌（3）涂布器 防止雜菌污染（4）5×107