回答下列關于基因工程的問題
下圖1是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線，表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖2、圖3中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。
（1）若對圖2中質粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質粒的熱穩定性如何變化，為什么？
（2）圖中將人乳鐵蛋白基因插入質粒，可以只用EcoR I同時酶切質粒和人乳鐵蛋白基因，也可以使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時酶切質粒和人乳鐵蛋白基因，后一個方法的優點在于可以防止 。
（3）為了獲取重組質粒，將切割后的質粒與目的基因片段混合，并加入 酶。重組質粒中抗生素抗性基因的作用是為了 。
（4）圖1過程①可采用的操作方法是 ，過程②可采用的生物技術是 。過程③可采用的生物技術是 。
（5）分別從分子水平簡述雌性轉基因牛分泌人乳鐵蛋白的過程是_______________。
科目：高中生物 來源： 題型：
回答下列關于基因工程的問題
下圖1是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線，表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖2、圖3中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。
（1）若對圖2中質粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質粒的熱穩定性如何變化，為什么？
（2）圖中將人乳鐵蛋白基因插入質粒，可以只用EcoR I同時酶切質粒和人乳鐵蛋白基因，也可以使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時酶切質粒和人乳鐵蛋白基因，后一個方法的優點在于可以防止 。
（3）為了獲取重組質粒，將切割后的質粒與目的基因片段混合，并加入 酶。重組質粒中抗生素抗性基因的作用是為了 。
（4）圖1過程①可采用的操作方法是 ，過程②可采用的生物技術是 。過程③可采用的生物技術是 。
（5）分別從分子水平簡述雌性轉基因牛分泌人乳鐵蛋白的過程是_______________。
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科目：高中生物 來源： 題型：閱讀理解
回答下列關于基因工程的問題：
如圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”示意圖，所用載體為質粒A。已知細菌B細胞內不含質粒A，也不含質粒A上的基因，質粒A導入細菌B后，其上的基因能得到表達，根據圖示所給信息回答下列問題：
(1)將目的基因和質粒結合形成重組質粒時，用同一種限制性內切酶分別切割目的基因和質粒，露出相同的黏性末端，將切下的目的基因片段插入質粒的切口處再加入適量的 ，使質粒與目的基因結合成重組質粒。
(2)目前把重組質粒導入細菌細胞時，效率還不高；導入完成后得到的細菌，實際上有的根本沒有導入質粒；有的導入的是普通質粒A；只有少數導入的是重組質粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細菌是否導入了質粒A或重組質粒：
將得到的細菌涂抹在一個含有 的培養基上，能夠生長的就是導入質粒A或重組質粒的，反之則沒有。此過程中體現了質粒作為運載體必須具備的兩個條件 ； 。
(3)若進一步鑒定證明細菌中導入的是普通質粒A還是重組質粒，將得到的細菌涂抹在一個含有
的培養基上培養，若細菌 ，則導入的是普通質粒。如果利用DNA分子雜交原理來證明此過程，應該用 作為探針。
（4）使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞內，主要是借鑒 的途徑。
(5) 目的基因表達成功后，“工程菌”明顯不同于細菌D。從變異的來源看，此變異屬于
。導入細菌B細胞中的目的基因成功表達的標志是什么? 。
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科目：高中生物 來源：河北省衡水中學2009—2010學年度第二學期期中考試高二生物試卷 題型：綜合題
回答下列關于基因工程的問題：
如圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”示意圖，所用載體為質粒A。已知細菌B細胞內不含質粒A，也不含質粒A上的基因，質粒A導入細菌B后，其上的基因能得到表達，根據圖示所給信息回答下列問題：
(1)將目的基因和質粒結合形成重組質粒時，用同一種限制性內切酶分別切割目的基因和質粒，露出相同的黏性末端，將切下的目的基因片段插入質粒的切口處再加入適量的 ，使質粒與目的基因結合成重組質粒。
(2)目前把重組質粒導入細菌細胞時，效率還不高；導入完成后得到的細菌，實際上有的根本沒有導入質粒；有的導入的是普通質粒A；只有少數導入的是重組質粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細菌是否導入了質粒A或重組質粒：
將得到的細菌涂抹在一個含有 的培養基上，能夠生長的就是導入質粒A或重組質粒的，反之則沒有。此過程中體現了質粒作為運載體必須具備的兩個條件 ； 。
(3)若進一步鑒定證明細菌中導入的是普通質粒A還是重組質粒，將得到的細菌涂抹在一個含有
的培養基上培養，若細菌 ，則導入的是普通質粒。如果利用DNA分子雜交原理來證明此過程，應該用 作為探針。
（4）使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞內，主要是借鑒 的途徑。
(5)目的基因表達成功后，“工程菌”明顯不同于細菌D。從變異的來源看，此變異屬于
。導入細菌B細胞中的目的基因成功表達的標志是什么? 。
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科目：高中生物 來源：2012-2013學年江蘇省高三最后一次模擬考試生物試卷 題型：綜合題
回答下列關于基因工程的問題。
草甘膦是一種廣譜除草劑，其除草機制是抑制植物體內EPSPS酶的合成，最終導致植物死亡。但是，它的使用有時也會影響到植物的正常生長。目前，已發現可以從一種抗草甘膦的大腸桿菌突變株中分離出EPSPS基因，若將該基因轉入植物細胞內， 從而獲得的轉基因植物就能耐受高濃度的草甘膦。
下圖A-F表示6株植物，其中，植物A和D對草甘膦敏感，B和E對草甘膦天然具有抗性，C和F則經過了轉基因處理，但是是否成功還未知。圖1和2分別表示兩段DNA序列。表格中1-4分別表示4種限制性核酸內切酶的酶切位點。據圖回答下列問題：
（1）若A-C澆清水，D-F澆的水中含有草甘膦，上述植物中，肯定能健康成長的是_________。
（2）若要從大腸桿菌中篩選出含EPSPS基因的突變菌株甲，在大腸桿菌培養基中還必須加入 ___________。
（3）假設位于EPSPS基因兩側的DNA序列均如圖1所示，則應選擇表中酶__________進行酶切；若位于EPSPS基因兩側的DNA序列分別如圖1和2所示，則應選擇表中酶__________ 進行酶切。
（4）假設大腸桿菌突變菌株甲中EPSPS基因的右側序列如圖2所示，請在方框內畫出經酶切后產生的兩個末端的堿基序列。（2分）
（5）假設EPSPS基因已被成功轉移到植物F中，但植物F仍沒有表現出抗性，分析可能的原因_____________。
下圖甲是某目的基因（4.0kb，1kb=1000對堿基）與大腸桿菌pUC18質粒（2.7kb）重組的示意圖。圖中Ap′是抗氨芐青霉素基因，lacZ是顯色基因，其上的EcoRI識別位點位于目的基因插入位點的右側，其控制合成的物質能使菌落呈現藍色。（圖乙中深色圓點即為藍色菌落）
（6）圖乙的培養基中含有氨芐青霉素，請判斷圖乙中所出現的白色和藍色兩種菌落中，何種會含有重組質粒。___________。
（7）現用EcoRI酶切質粒，酶切后進行電泳觀察，若出現長度為_________kb和 kb的片段，則可以判斷該質粒已與目的基因重組成功。（重組質粒上目的基因的插入位點與EcoRI的識別位點之間的堿基對忽略不計）
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科目：高中生物 來源：河北省2009—2010學年度第二學期期中考試高二生物試卷 題型：綜合題
回答下列關于基因工程的問題：
如圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”示意圖，所用載體為質粒A。已知細菌B細胞內不含質粒A，也不含質粒A上的基因，質粒A導入細菌B后，其上的基因能得到表達，根據圖示所給信息回答下列問題：
(1)將目的基因和質粒結合形成重組質粒時，用同一種限制性內切酶分別切割目的基因和質粒，露出相同的黏性末端，將切下的目的基因片段插入質粒的切口處再加入適量的 ，使質粒與目的基因結合成重組質粒。
(2)目前把重組質粒導入細菌細胞時，效率還不高；導入完成后得到的細菌，實際上有的根本沒有導入質粒；有的導入的是普通質粒A；只有少數導入的是重組質粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細菌是否導入了質粒A或重組質粒：
將得到的細菌涂抹在一個含有 的培養基上，能夠生長的就是導入質粒A或重組質粒的，反之則沒有。此過程中體現了質粒作為運載體必須具備的兩個條件 ； 。
(3)若進一步鑒定證明細菌中導入的是普通質粒A還是重組質粒，將得到的細菌涂抹在一個含有
的培養基上培養，若細菌 ，則導入的是普通質粒。如果利用DNA分子雜交原理來證明此過程，應該用 作為探針。
（4）使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞內，主要是借鑒 的途徑。
(5) 目的基因表達成功后，“工程菌”明顯不同于細菌D。從變異的來源看，此變異屬于
。導入細菌B細胞中的目的基因成功表達的標志是什么? 。
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