Question

回答下列關于基因工程的問題：

如圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”示意圖，所用載體為質粒A。已知細菌B細胞內不含質粒A，也不含質粒A上的基因，質粒A導入細菌B后，其上的基因能得到表達，根據圖示所給信息回答下列問題：

(1)將目的基因和質粒結合形成重組質粒時，用同一種限制性內切酶分別切割目的基因和質粒，露出相同的黏性末端，將切下的目的基因片段插入質粒的切口處再加入適量的             ，使質粒與目的基因結合成重組質粒。

(2)目前把重組質粒導入細菌細胞時，效率還不高；導入完成后得到的細菌，實際上有的根本沒有導入質粒；有的導入的是普通質粒A；只有少數導入的是重組質粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細菌是否導入了質粒A或重組質粒：

將得到的細菌涂抹在一個含有                的培養基上，能夠生長的就是導入質粒A或重組質粒的，反之則沒有。此過程中體現了質粒作為運載體必須具備的兩個條件                      ；                                            。

(3)若進一步鑒定證明細菌中導入的是普通質粒A還是重組質粒，將得到的細菌涂抹在一個含有

                的培養基上培養，若細菌                ，則導入的是普通質粒。如果利用DNA分子雜交原理來證明此過程，應該用                                    作為探針。

（4）使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞內，主要是借鑒                        的途徑。

(5) 目的基因表達成功后，“工程菌”明顯不同于細菌D。從變異的來源看，此變異屬于         

       。導入細菌B細胞中的目的基因成功表達的標志是什么?                    。

Answer 1

（1）DNA連接酶     

（2）氨芐青霉素    具有標記基因      能在宿主細胞內復制并穩定的保存    

（3）四環素   能生長      放射性同位素（或熒光分子）標記的胰島素基因  

（4）細菌或病毒侵染細胞

（5）基因重組        受體細胞通過轉錄和翻譯過程合成出相應的蛋白質（生長激素）

解析:

考查基因工程的知識。

（1）連接目的基因和質粒切口的酶是DNA連接酶。

（2）檢測目的基因是否導入可通過檢測標記基因表達產物。

（3）檢測導入的是普通質粒還是重組質粒，可通過目的基因插入的位置（四環素抗性基因）檢測。

（4）重組DNA分子導入受體細胞通過病毒感染細胞方法。

（5）基因工程引起變異的來源是基因重組，目的基因成功表達的標志是目的基因控制合成的蛋白質（生長激素）合成。