Question

【題目】如圖所示質粒PZHZ11（總長3．6 kb，1 kb=1000對堿基）中，lacZ基因編碼β-半乳糖苷酶，后者催化生成化合物能將白色大腸桿菌染成藍色（考慮目的基因和質粒正向和反向連接）。

（1）若先用限制酶BamH I切開pZHZ11，然后滅活BamH I酶，再加DNA連接酶進行連接，最后將連接物導入足夠數量的大腸桿菌細胞中，則含3．1 kb質粒的細胞顏色為 ；含3．6 kb質粒的細胞顏色為 。

（2）若將兩端分別用限制酶BamH I和Bgl II切開的單個目的基因片段置換pZHZ11中0．5 kb的BamH I酶切片段，形成4．9 kb的重組質粒，則目的基因長度為 kb。

（3）上述4．9 kb的重組質粒有兩種形式，若用BamH I和EcoR I聯合酶切其中一種，只能獲得1．7 kb和3．2 kb兩種DNA片段；那么聯合酶切同等長度的另一種重組質粒，則獲得的兩種DNA片段長度為 kb。

（4）若將人的染色體DNA片段先導入大腸桿菌細胞中克隆并鑒定目的基因，然后再將獲得的目的基因轉入植物細胞中表達，最后將產生的藥物蛋白注入小鼠體內觀察其生物功能是否發揮，那么上述過程屬于 。

A．人類基因工程 B．動物基因工程

C．植物基因工程 D．微生物基因工程

Answer 1

【答案】（1）白色

白色和藍色/白色或藍色

（2）1．8

（3）1．4、3．5

（4）C

【解析】

試題分析：（1）若先用限制酶BamHⅠ切開pZHZ11，然后滅活BamHI酶，則破壞了lacZ基因，導致β-半乳糖苷酶不能合成．而β-半乳糖苷酶催化生成的化合物能將變色的大腸桿菌染成藍色，所以含3．1kb質粒的細胞顏色為白色；含3．6kb質粒的細胞中，如果lacZ基因能正常表達，則顏色為藍色；如果lacZ基因不能正常表達，則顏色為白色。

（2）若將兩段分別用限制酶BamHI和BglHI切開的單個目的基因片段置換pZHZ11中0．5kb的BamHI酶切片段，形成4．9kb的重組質粒，則目的基因長度為4．9-（3．6-0．5）=1．8kb。

（3）上述4．9kb的重組質粒有兩種形式，若用BamHI和EcoRI聯合酶切其中一種，只能獲得1．7kb和3．2kb兩種DNA片段，說明右側BamHI和EcoRI之間的長度為1．7；用聯合酶切同等長度的另一種重組質粒，則切割的是BamHI左側的位點，可獲得1．7+1．8=3．5kb和4．9-3．5=1．4kb兩種DNA片段。

（4）由于將人的染色體DNA片段先導入大腸桿菌細胞中克隆并堅定目的基因，然后再將獲得的目的基因轉入植物細胞中表達，并將產物的藥物單獨注入小鼠體內觀察其生物功能是否發揮，所以該過程屬于植物基因工程。