Question

【題目】培育具有抗除草劑性狀的植物A的實驗流程如下圖所示。報告基因可以使細胞在特定情況下表達產物，易于檢測、且不影響實驗材料產生新的性狀，質粒上的報告基因的產物能催化無色物質B呈現藍色。請回答下列問題：

（1）常用___________處理農桿菌，促進重組表達載體轉化到農桿菌細胞內。在篩選過程1中，用含有____________的培養基篩選成功導入重組表達載體的農桿菌。

（2）通過農桿菌轉化法，______________基因會隨T-DNA轉移到植物A的染色體DNA上。

（3）為選出細胞內含轉化后的農桿菌的愈傷組織，在篩選過程2中，還需要用______________________處理愈傷組織，挑選___________的愈傷組織繼續培養成植株。

（4）對轉基因植物A進行個體生物學水平鑒定的方法是__________________________________。

Answer 1

【答案】Ca2+（CaCl2） 氨芐青霉素 除草劑抗性基因和報告 無色物質B 呈現藍色 噴灑一定量或適量的除草劑，觀察植株是否存活

【解析】

圖中構建的基因表達載體在篩選1時需要在培養基中加入氨芐青霉素以篩選成功導入表達載體的農桿菌；利用農桿菌感染法將表達載體導入受體細胞，由于“報告基因”編碼的蛋白質能催化無色物質B呈現藍色，所以圖中篩選2時需要用無色物質B處理愈傷組織，以篩選出呈現藍色的組織。

（1）為提高表達載體進入農桿菌的效率需要用Ca2+處理細胞，使之成為感受態的細胞，易于吸收重組質粒。氨芐青霉素抗性基因作為標記基因，鑒別并篩選含有目的基因的細胞，含氨芐青霉素的培養基能將成功導入表達載體的農桿菌篩選出來，所以，在篩選過程1中，用含有氨芐青霉素的培養基篩選成功導入重組表達載體的農桿菌。

（2）由圖所示，報告基因和目的基因即除草劑抗性基因位于基因表達載體質粒的T—DNA上，所以，通過農桿菌轉化法，除草劑抗性基因和報告基因會隨T-DNA轉移到植物A的染色體DNA上。

（3）根據題意可知，報告基因的產物能催化無色物質B呈現藍色，因此篩選2需要用無色物質B處理愈傷組織并篩選出呈現藍色的組織。

（4）對于轉基因植物A，如果目的基因成功表達則其具有抗除草劑特性，因此，對轉基因植物A進行個體生物學水平鑒定的方法是噴灑一定量或適量的除草劑，觀察植株是否存活。