Question

【題目】【選修1——生物技術實踐】

急性腸胃炎是由細菌通過消化道進入人體導致的。因此檢驗飲用水中細菌的含量是有效監控疾病發生的必要措施。請回答下列與檢驗飲用水有關的問題：

（1）為檢驗大腸桿菌的含量時，該小組將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1ml稀釋液；經適當培養后，3個平板上的菌落數分別為44、43和42，據此可得出每升水樣中的活菌數為________。但通常計算出來的活菌數目往往比實際的數目低，原因是_____________________。

（2）用該方法統計樣本菌落數時是否需要對照組？______。為什么？_____________。

（3）有三種材料或用具需要消毒或滅菌：①培養細菌用的培養基與培養皿；②玻璃棒、試管和燒瓶；③實驗操作者的雙手。其中需要消毒的是________________，需要滅菌的是________________。

（4）下圖所示的四種菌落分布中，不可能由稀釋涂布平板法得到的是____________。

（5）已知大腸桿菌能發酵乳糖并產酸、產氣，現提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養液和具有塞子的試管，應如何判斷水樣中是否有大腸桿菌？____________________________________。

Answer 1

【答案】4.3×107當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落需要因為需要判斷培養基是否被雜菌污染(培養基滅菌是否合格）③①②D通過無菌操作向試管內注入一定量待測水樣，再注入適量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養液，塞上塞子，混勻后置于37℃恒溫箱培養24 h。若試管內有氣泡生成，則說明水樣中有大腸桿菌，否則，說明水樣中無大腸桿菌

【解析】分析：微生物的營養物質主要包括碳源、氮源、水和無機鹽等．微生物的培養的關鍵是無菌操作，接種后的培養皿應該倒置培養。分類或篩選微生物常用的接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法。可以根據菌落的特征進行初步的鑒定或分類。

（1）由由題意知1ml水樣中的菌落數是（44+43+42）÷3÷0.1×100=4.3×104個，每升水樣中的活菌數為3.8×104×103=4.3×107．當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落導致通常計算出來的活菌數目往往比實際的數目低；

（2）因為需要判斷培養基是否被雜菌污染(培養基滅菌是否合格），所以用該方法統計樣本菌落數時是否需要對照組；

（3）在使用操作過程中，實驗操作者的雙手應當進行消毒，培養細菌用的培養基與培養皿應當進行滅菌，玻棒、試管、燒瓶和吸管等玻璃器皿應當進行干熱滅菌；

（4）題干所述方法為稀釋涂布平板法．據圖分析，A、B、C三個培養皿的菌落分別均勻，應該屬于稀釋涂布平板法得到的，D屬于平板劃線法接種得到的，不可能是稀釋涂布平板法得到的，故選D；

（5）通過無菌操作向試管內注入一定量待測水樣，再注入適量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養液，塞上塞子，混勻后置于37℃恒溫箱培養24 h。若試管內有氣泡生成，則說明水樣中有大腸桿菌，否則，說明水樣中無大腸桿菌。