Question

【題目】人外周血單核細胞能合成白介素2（IL-2），該蛋白可增強機體免疫功能，但在體內易被降解。研究人員將IL-2基因與人血清白蛋白（HSA）基因拼接成一個融合基因，并在酵母菌中表達，獲得具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2- HSA融合蛋白。其技術流程如圖。請回答：

（1）圖中②過程需要______________酶的參與。

（2）表達載體1中的位點__________，應為限制酶BglⅡ的識別位點，才能成功構建表達載體2。

（3）表達載體2導入酵母菌后，融合基因轉錄出的 mRNA中，與IL-2蛋白對應的堿基序列不能含有_______（起始、終止）密碼子，才能成功表達出IL-2-HSA融合蛋白。

（4）應用_____________雜交技術可檢測酵母菌是否表達出IL-2- HSA融合蛋白。

Answer 1

【答案】（1）反（或逆）轉錄

（2）a

（3）終止

（4）抗原-抗體

【解析】

試題分析：（1）圖中②mRNA→cDNA，表示逆轉錄過程。

（2）根據目的基因IL-2cDNA的兩端的酶切位點分別是EcoRⅠ和BglⅡ，所以表達載體1也必須有這兩個酶切位點，表達載體1上已有EcoRⅠ，推測位點a應含有BglⅡ。

（3）融合基因轉錄出的mRNA中與IL-2蛋白對應的堿基序列中不能含有終止密碼，才能成功表達出IL-2-HsA融合蛋白．否則HSA蛋白將無法合成。

（4）應用抗原-抗體雜交技術可檢測酵母菌是否表達出IL-2-HSA融合蛋白。