Question

【題目】人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

（1）htPA基因與載體用_________切割后，通過DNA連接酶連接，以構建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用_________技術。

（2）為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其__________。采集的精子需要經過__________，才具備受精能力。

（3）將重組表達載體導入受精卵常用的方法是__________。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行__________。利用胚胎分割和胚胎移植技術可獲得８多個轉基因個體，這體現了早期胚胎細胞的__________。

（4）若在轉ht-PA基因母羊的羊乳中檢測到__________，說明目的基因成功表達。

Answer 1

【答案】（1）同種限制性核酸內切酶（或同種限制酶） DNA分子雜交（或核酸探針）

（2）超數排卵；獲能（處理）

（3）顯微注射法 性別鑒定；全能性

（4）htPA（或人組織纖溶酶原激活物）

【解析】

試題分析：（1）在基因工程中，構建基因表達載體時，把目的基因與運載體一般用同種限制酶進行切割，再用DNA連接酶連接，以構建基因表達載體；檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用DNA分子雜交技術。

（2）超數排卵處理時，需要注射促性腺激素；采集的精子必須經過獲能處理后才具備受精能力。

（3）將重組DNA分子導入動物細胞的方法是顯微注射法；為了獲得母羊，胚胎移植前需要對胚胎進行性別鑒定；利用胚胎分割和胚胎移植技術可以獲得多個轉基因個體，這體現了早期胚胎細胞的全能性。

（4）目的基因基因成功表達的標志是htPA基因（目的基因）在母羊的羊乳細胞中轉錄翻譯出相應的蛋白質（人組織纖溶酶原激活物）。