Question

【題目】營養缺陷型菌株就是在人工誘變或自發突變后，微生物細胞代謝調節機制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應不能進行的菌株。這種菌株能積累正常菌株不能積累的某些代謝中間產物，為工業生產提供大量的原料產物。以下是實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程。回答下列問題：

（1）過程①的接種方法為______，與基本培養基（只含碳源、無機鹽、水）相比，待測培養皿中特有的成分有______。

（2）進行②過程培養時，應先將絲絨布轉印至基本培養基上，原因是______。從______培養基上獲得相應的營養缺陷型菌株。釆用影印法培養的優點是______。

（3）為了進一步完成對初檢的營養缺陷型菌株的鑒定，實驗人員進行了如下操作：

①用接種針挑取______（填“菌落A”或“菌落B”）接種于盛有完全培養液的離心管中，28℃振蕩培養1～2天后，離心，取沉淀物用______洗滌3次，并制成菌懸液。

②吸取1mL菌懸液加入無菌培養皿中，傾注15mL融化并冷卻至4550℃的基本培養基，待其冷凝后用記號筆在皿底劃分五個區域，標記為A、B、C、D、E。

③在劃分的五個區域上放入少量分組的氨基酸粉末（如下表所示），經培養后，觀察生長圈出現的區域，從而確定屬于何種氨基酸缺陷型。

組別	所含氨基酸
A	組氨酸	蘇氨酸	谷氨酸	天冬氨酸	亮氨酸
B	精氨酸	蘇氨酸	賴氨酸	甲硫氨酸	苯丙氨酸
C	酪氨酸	谷氨酸	賴氨酸	色氨酸	丙氨酸
D	甘氨酸	天冬氨酸	甲硫氨酸	色氨酸	絲氨酸
E	半胱氨酸	亮氨酸	苯丙氨酸	丙氨酸	絲氨酸

在上述鑒定實驗中，發現在培養基A、D區域出現生長圈，說明該營養缺陷型菌株屬于______。

Answer 1

【答案】稀釋涂布平板法 氨基酸 防止將特定營養成分帶入培養基 完全 同種菌株的接種位置相同 菌落A 無菌水 天冬氨酸缺陷型

【解析】

分析題圖：圖中首先利用稀釋涂布平板法分離細菌，然后運用“影印法”將菌種接種到兩種培養基中：基本培養基、完全培養基。在基本培養基中，氨基酸缺陷型菌株不能生長，而在完全培養基中能夠生長，據此可以選擇出氨基酸缺陷型菌株。

（1）根據過程①培養的效果圖可以判斷，該過程所采用的接種方法為稀釋涂布平板法。圖示為實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程，據此可知：與基本培養基（只含碳源、無機鹽、水）相比，待測培養皿中的特有的成分有氨基酸。

（2）為了防止將特定營養成分帶入培養基，進行②過程培養時，應先將絲絨布轉印至基本培養基上。氨基酸缺陷型菌株只能在完全培養基或補充了相應的氨基酸的基本培養基中生長，因此應從題圖中完全培養基上獲得相應的營養缺陷型菌株。釆用影印法培養的優點是同種菌株的接種位置相同。

（3）為了進一步完成對初檢的營養缺陷型菌株的鑒定，結合對（2）的分析可知：①用接種針挑取菌落A接種并培養；離心后菌株存在于沉淀物中，為了防止雜菌污染，需取沉淀物用無菌水洗滌3次，并制成菌懸液。

③表中信息顯示：A、D區域含有、其它區域不含有的氨基酸是天冬氨酸，而實驗結果只有A、D區域出現生長圈，說明該營養缺陷型菌株屬于天冬氨酸缺陷型。