Question

【題目】如圖表示分離、純化及保存枯草芽孢桿菌菌株的簡要過程，回答下列問題：
（1）將土壤表層泥土稀釋液煮沸15min后獲得的樣品中，仍然含有一些活的菌種，原因是 ．
（2）圖中將菌種接種到平板1的方法是；將菌種接種到平板2之前，接種工具常用法進行滅菌．為了逐步分離、純化得到目的菌種，平板1和平板2中的培養類型都應該屬于培養基．對于使用頻繁的菌種可接種到上圖試管中的培養基上臨時保藏．
（3）用稀釋涂布平板法在5個平板上都接種稀釋倍數為104的樣品液0.1mL，培養一段時間后，平板長出來的菌落數分別為182、160、168、175和190，據此推測，每mL樣品液中的細菌數量為個．稀釋涂布平板法能夠通過統計平板上的菌落數來推測樣品中的活菌數目，原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）煮沸消毒法不能殺死細菌的全部芽孢和孢子
（2）稀釋涂布平板法；灼燒滅菌（灼燒）；選擇；固體斜面
（3）1.75×107；當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌
【解析】解：（1）煮沸消毒法不能殺死細菌的全部芽孢和孢子，因此土壤表層泥土稀釋液煮沸15min后獲得的樣品中，仍然含有一些活的菌種．（2）分析圖解可知，圖示平板1利用涂布棒進行涂布稀釋，即圖中將菌種接種到平板1的方法為稀釋涂布平板法；將菌種接種到平板2之前，接種工具常用灼燒滅菌（灼燒）法進行滅菌．為了逐步分離、純化得到目的菌種，平板1和平板2中的培養類型都應該屬于選擇培養基．對于使用頻繁的菌種可接種到上圖試管中的固體斜面培養基上臨時保藏．（3）用稀釋涂布平板法在5個平板上都接種稀釋倍數為104的樣品液0.1mL，培養一段時間后，平板長出來的菌落數分別為182、160、168、175和190，據此推測，每mL樣品液中的細菌數量=（182+160+168+175+190）÷5÷0.1×104=1.75×107個．當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，因此稀釋涂布平板法能夠通過統計平板上的菌落數來推測樣品中的活菌數目． 故答案為：（1）煮沸消毒法不能殺死細菌的全部芽孢和孢子；（2）稀釋涂布平板法；灼燒滅菌（灼燒）；選擇；固體斜面；（3）1.75×107；當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌
1、無菌技術的主要內容：①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒；②將用于微生物培養的器皿、接種用具和培養基等器具進行滅菌③為避免周圍環境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；④實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸．2、消毒和滅菌：

比較項目	理化因素的作用強度	消滅微生物的數量	芽孢和孢子能否被消滅
消毒	較為溫和	部分生活狀態的微生物	不能
滅菌	強烈	全部微生 物	能

·3、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落．