Question

【題目】物質W是一種含氮有機物，會污染土壤。W在培養基中達到一定量時培養基表現為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌（目標菌）。回答下列問題。

（1）要從土壤中分離目標菌，所用選擇培養基中的氮源應該是_________。

（2）在從土壤中分離目標菌的過程中，發現培養基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成菌落（如圖所示）。如果要得到目標菌，應該選擇________菌落進一步純化，選擇的依據是________。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設計實驗進一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出實驗思路、預期結果和結論，即_______。

（4）該小組將人工合成的一段DNA轉入大腸桿菌，使大腸桿菌產生能降解W的酶（酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進行如下實驗，請完善相關內容。

①在含有一定濃度W的固體培養基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加_________，三處滴加量相同。

②一段時間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現透明圈，說明___________；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明___________。

Answer 1

【答案】W 乙 乙菌落周圍出現透明圈，說明乙菌能降解W 將甲、乙菌分別接種在無氮源培養基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源 緩沖液 緩沖液不能降解W 酶E與天然酶降解W的能力相近

【解析】

篩選培養基是指根據某種微生物的特殊營養要求或對某些化學、物理因素的抗性而設計的，能選擇性地區分這種微生物的培養基。利用選擇培養基，可使混合菌群中的目標菌種變成優勢種群，從而提高該種微生物的篩選效率。

（1）該研究小組的目標菌是能夠降解物質W的細菌，而物質W是一種含氮有機物，故可作篩選培養基中的氮源。

（2）研究小組的目標菌，是能夠降解物質W的細菌，培養基中乙菌落的周圍出現透明圈，說明乙菌落能夠降解物質W，故乙菌落為該小組的目標細菌。

（3）目標菌能夠利用空氣中的氮氣作為氮源，故選用的篩選培養基不添加氮源，能夠在無氮源的培養基上生存的細菌便是目的細菌，故實驗操作為：將甲、乙菌分別接種在無氮源培養基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源。

（4）①C處作為空白對照，要排除作為溶劑的緩沖液對實驗可能造成的影響，故需要在C處滴加緩沖液，且保持滴加量相同；②培養基中的透明圈表示物質W被降解的情況，若C處不出現透明圈，則說明緩沖液不能降解物質W；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明物質W被降解的程度相近，即酶E與天然酶降解物質W的能力相近。