Question

【題目】目前廣泛應用的新型冠狀病毒檢測方法是實時熒光RT-PCR技術。RT—PCR是將RNA逆轉錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈式擴增反應相結合的技術，具體過程如圖所示，下列說法不正確的是（ ）

A.引物A與引物B應該具有不同的堿基序列

B.過程Ⅱ通過控制溫度的變化實現目標序列的循環擴增

C.該反應體系中應加入緩沖液、引物、四種核糖核苷酸、逆轉錄酶、Taq酶等物質

D.該檢測方法的應用依賴于新型冠狀病毒特異性序列的確定

Answer 1

【答案】C

【解析】

1、分析圖示，過程Ⅰ是由mRNA形成cDNA的過程，表示逆轉錄。過程Ⅱ先使mRNA-cDNA雜合雙鏈解開，再以單鏈的DNA合成雙鏈的DNA，最后利用RCR技術進行DNA復制。

2、PCR技術的原理是模擬生物體內DNA分子復制的過程，利用DNA分子熱變性原理，通過控制溫度控制DNA分子的解聚和結合，DNA分子體內復制過程DNA的解旋是在解旋酶的作用下實現的；PCR擴增DNA片段過程最高經過n次擴增，形成的DNA分子數是2n個，其中只有2條單鏈不含有引物。

A、引物A與引物B分別結合在目的片段序列的兩端，其堿基序列不同，A正確；

B、過程Ⅱ為PCR的反應階段，通過控制溫度的變化實現變性、退火、延伸，實現目標序列的循環擴增，B正確；

C、RT-PCR反應體系中應加入緩沖液、引物、四種脫氧核糖核苷酸、逆轉錄酶、Taq酶等物質，而不是四種核糖核苷酸，C錯誤；

D、RT-PCR的前提條件是目的片段的特異性序列的確定，D正確。

故選C。