Question

【題目】下圖為利用奶牛的乳汁生產胰島素的流程圖。回答下列問題：

（1）首先獲取的胰島素基因稱為_____________。若要獲得大量的胰島素基因可采用_______技術。而質粒通常用作基因工程的載體，其基本組成單位是 _____________。

（2）據圖分折，最好選用___（填限制酶名稱）分別切割目的基因和質粒分子。當胰島素基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是__________。

（3）將重組質粒導入受精卵的方法是_____________；經檢測，胰島素基因已導入受體細胞的基因組中，需要在分子水平上檢測是否能翻譯出胰島素，通常采用的方法是___________。

（4）通過乳腺生物反應器生產胰島素，需提前對形成的受精卵進行篩選，保留含性染色體組組成為______________（填“XX”或“XY”）的類型。

Answer 1

【答案】目的基因 PCR 脫氧核苷酸 SmaⅠ、PstⅠ 磷酸二酯鍵 顯微注射法 抗原—抗體雜交 XX

【解析】

本題主要考查基因工程的相關知識。基因表達載體的組成包括：啟動子（RNA聚合酶的結合部位）、終止子（一段有特殊結構的DNA短片段，轉錄結束的標志）、目的基因、標記基因（供重組DNA的鑒定和選擇）、復制原點（DNA復制起點，即DNA聚合酶結合位點）；選擇限制酶必須保證不破壞目的基因，能將載體切開，不破壞標記基因，限制酶和DNA連接酶作用的都是磷酸二酯鍵；游離的目的基因進入細胞一般會直接被分解，無復制原點和啟動子，故無法跟著細胞分裂進行復制，導致子代細胞中不再含有目的基因，也不能表達。

（1）首先獲取的胰島素基因稱為目的基因。若要獲得大量的胰島素基因可采用PCR技術進行擴增。而質粒是環狀的DNA分子，其基本組成單位是脫氧核苷酸。

（2）據圖分折，最好選用SmaⅠ、PstⅠ分別切割目的基因和質粒分子。當胰島素基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是磷酸二酯鍵。

（3）將重組質粒導入受精卵的方法是顯微注射法；經檢測，胰島素基因已導入受體細胞的基因組中，需要在分子水平上檢測是否能翻譯出胰島素，通常采用的方法是抗原—抗體雜交。

（4）通過乳腺生物反應器生產胰島素，需提前對形成的受精卵進行篩選，要選雌性的受精卵，故保留含性染色體組成為XX的類型。