Question

【題目】菊天牛是菊花的最主要的害蟲，科研人員將抗蟲基因轉入菊花培育出抗蟲菊花，下圖是獲得轉基因菊花的技術流程。請回答下列問題：

注:卡那酶素抗性基因（kanR)為標記基因，菊花葉片對卡那霉素高度敏感

(1)利用PCR技術擴增抗蟲基因時，需用耐高溫的___________催化，PCR—般要經歷三十次以上的循環，每次循環包括_____________三步。

(2)常用Ca2+處理土壤農桿菌，其目的是______________。重組Ti質粒整合到菊花葉肉細胞的________上。

(3)將愈傷組織轉移到添加一定濃度植物激素、營養物質以及_________的固體培養基中，在適宜條件下進行培養，篩選轉基因菊花。檢驗轉基因菊花的抗蟲性狀，常用的方法是______________。

(4)將轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當比例混合后飼喂菊天牛2齡幼蟲，實驗組飼喂轉基因植株，對照組應飼喂等量的正常植株。實驗結果顯示，實驗組的害蟲死亡率明顯高于對照組，說明__________。

Answer 1

【答案】 熱穩定DNA聚合酶（或Taq酶） 變性、復性和延伸 提高受體細胞的轉化率（或使之成為能吸收周圍環境中DNA分子的感受態細胞） 染色體 卡那霉素 在轉基因菊花上投放菊天牛 轉基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用

【解析】試題分析：分析題圖：圖示為獲得轉基因菊花的技術流程圖，目的基因（抗蟲基因）和質粒構建基因表達，采用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞，再采用植物組織培養技術將受體細胞培養成轉基因植株。

（1）PCR技術中，因需要高溫解旋，故需用耐高溫的DNA聚合酶催化，每次循環包括變性、復性和延伸三個步驟。

（2）將目的基因導入植物細胞時，常采用感受態細胞法，即用Ca2+（或CaCl2）處理農桿菌細胞，使其處于易于吸收周圍環境中的感受態。農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。

（3）由圖可知，標記基因是卡那霉素抗性基因，因此可用含有卡那霉素的培養基來篩選轉基因菊花。檢驗轉基因菊花的抗蟲性狀，常用方法是投放菊天牛，若菊天牛大量死亡，說明轉基因成功。

（4）實驗組的害蟲死亡率明顯高于對照組，說明轉基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。