Question

【題目】泡菜與酸奶均采用乳酸菌進行發酵。現有研究人員打算從泡菜中獲取可用于酸奶發酵的乳酸菌菌種，其操作如下：

（1）使用_________________法將少量泡菜汁接種于培養基上，經厭氧培養后得到圖示結果。

（2）將上述培養基中各菌落轉移至MRS-碳酸鈣固體培養基（配置方法為將MRS培養基冷卻至45～50℃時，加入已滅菌的碳酸鈣，充分混勻，倒平板）中，厭氧培養48小時后，發現有部分菌落的周圍出現透明圈，其原因是________________________________________。

（3）將上述培養基中具有透明圈的菌落，轉入MRS液體培養基中發酵48小時后，進行紙層析后顯色處理，得到下圖實驗結果（A為1．5％乳酸標樣，其余為不同菌種發酵液），則下列菌種屬于乳酸菌的是________________________。

（4）在鮮奶中加入上述菌種進行發酵后會出現固形物凝聚成團的現象，推測出現該現象的原因是____________________________________________。

（5）因為菌種相同，部分研究人員猜測制作酸奶的過程中可能會產生亞硝酸鹽，進而測出酸奶中的亞硝酸鹽含量為1mg／kg。于是他們認為制作酸奶的過程中會產生亞硝酸鹽，但是另一些研究人員認為這個結論不可靠，其理由是_____________________________。請給出改進實驗的思路，以進一步確定此結論的可靠性：

方案改進：______________________________________________________。

預期結果和結論：若___________________________________________，則說明酸奶發酵過程中會產生亞硝酸鹽。

Answer 1

【答案】稀釋涂布平板 細菌代謝產生的酸性物質分解碳酸鈣，形成透明圈 B、C、D 上述菌種發酵過程中產生的乳酸，降低了pH，使得其中的蛋白質的空間結構被破壞而凝聚成團 亞硝酸鹽可能來自于原料（鮮奶） 增設一組實驗，測定鮮奶中的亞硝酸鹽的含量 酸奶中亞硝酸鹽含量高于鮮奶中亞硝酸鹽含量

【解析】

據題文的描述和圖示分析可知：該題考查學生對實驗室中微生物的純化培養的方法及其分離等相關知識的識記和理解能力，以及能對實驗現象和結果進行解釋、分析和處理的能力并能對一些簡單的實驗方案做出恰當的評價和修訂能力。

(1) 根據培養的效果圖可以判斷：將少量泡菜汁接種于培養基上的接種方法是稀釋涂布平板法。

(2) 在加入CaCO3的MRS培養基中培養從泡菜汁中分離出來的各菌落，由于細菌代謝產生的酸性物質能夠分解培養基中的碳酸鈣，所以會在菌落周圍形成透明圈。

(3) 將上述周圍有透明圈的菌落轉入MRS液體培養基中發酵48小時后，進行紙層析后顯色處理，其結果如圖所示。已知A為1.5％乳酸標樣，B～E為不同菌種發酵液，其中的B、C、D均出現了與A相同的顯色結果，說明B、C、D菌種的發酵產物中均含有乳酸，因此都屬于乳酸菌的菌種。

(4) 在鮮奶中加入上述菌種（乳酸菌）進行發酵后會出現固形物凝聚成團的現象，究其原因是：上述菌種在發酵過程中產生的乳酸降低了奶液的pH，使得其中的蛋白質因空間結構被破壞而凝聚成團。

(5) 在酸奶中檢測出含有亞硝酸鹽，該亞硝酸鹽的來源可能是在制作酸奶的過程中產生的，也可能是來自于原料（鮮奶）。由于在制作酸奶之前沒有對鮮奶中是否含有亞硝酸鹽進行檢測，所以依據檢測的結果得出“制作酸奶的過程中會產生亞硝酸鹽”的結論是不可靠的。若要確定此結論的可靠性，需增設一組實驗，測定鮮奶中的亞硝酸鹽的含量。若測定結果為酸奶中亞硝酸鹽含量高于鮮奶中亞硝酸鹽含量，則說明酸奶發酵過程中會產生亞硝酸鹽。