Question

【題目】剛果紅能夠與纖維素形成紅色復合物，可用其鑒定纖維素分解菌。某研究小組將濾紙埋在土壤中，30天后從濾紙上取6 g土壤樣品加入30 mL生理鹽水中溶解，得到了富有纖維素分解菌的菌原液，并進行如下實驗，回答下列問題：

(1)稀釋菌原液：為確定合適的稀釋倍數，小組成員取1 mL菌原液進行如下圖所示的操作，在統計菌落時，發現平板上的平均菌落數為40個，則每毫升菌原液中的細菌數大約為________個。

(2)培養基的準備：在對培養基進行高壓蒸汽滅菌的過程中，完成加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓適當時間后，切斷熱源，讓滅菌鍋內溫度自然下降，________，打開排氣閥，旋開固定螺栓，開蓋，才可以取出滅菌的培養基等物品。待培養基冷卻至50℃左右時倒平板，在培養基凝固之前加入滅菌的剛果紅，從功能上來看，該培養基屬于________培養基，培養基中碳源主要是________。　

(3)接種與觀察：在無菌條件下，用________取0.1 mL稀釋后的菌懸液進行圖1中________所示的操作，室溫放置2～3分鐘后倒置于恒溫箱中培養，室溫放置2～3分鐘的目的是__________________。培養過程中定期觀察菌落特征和透明圈的大小，圖2中D/d的值越________，表示該菌對纖維素分解能力越強。

Answer 1

【答案】4×106 壓力表的壓力降為零 鑒別 纖維素 移液槍(移液管) 甲 使菌液完全被培養基吸收 大

【解析】

剛果紅染色法原理：剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色復合物。當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅——纖維素的復合物便沒法形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。

（1）分析題圖可知菌原液被稀釋了10000倍，每毫升菌原液中的細菌數大約為40╳10╳10000=4×106個。

（2）培養基的準備：在對培養基進行高壓蒸汽滅菌的過程中，完成加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓適當時間后，切斷熱源，讓滅菌鍋內溫度自然下降，壓力表的壓力降為零，打開排氣閥，旋開固定螺栓，開蓋，才可以取出滅菌的培養基等物品。待培養基冷卻至50℃左右時倒平板，在培養基凝固之前加入滅菌的剛果紅，剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色復合物，故從功能上來看，該培養基屬于鑒別培養基，培養基中碳源主要是纖維素。　

（3）接種與觀察：在無菌條件下，用移液槍(移液管)取0.1 mL稀釋后的菌懸液進行圖1中甲所示的操作，室溫放置2～3分鐘后倒置于恒溫箱中培養，室溫放置2～3分鐘的目的是使菌液完全被培養基吸收。培養過程中定期觀察菌落特征和透明圈的大小，根據剛果紅染色法原理，圖2中D/d的值越大，表示該菌對纖維素分解能力越強。